药品致敏性检测分析

检测项目

过敏原成分检测：

• 特异性IgE抗体检测：针对花生、牛奶、鸡蛋等常见过敏原的IgE抗体滴度（kUA/L，参照ISO10933-2）
• 过敏原蛋白定量：β-乳球蛋白、酪蛋白等致敏蛋白含量（mg/kg，参照GB/T21703）
• 隐性过敏原筛查：未标识的坚果、大豆成分（实时荧光PCR法，检测限≤10copies/μL）

致敏潜力体外评估：

• 树突状细胞成熟标志物：CD80、CD86表达率（%，流式细胞术）
• T细胞增殖试验：CFSE荧光强度衰减率（%，参照OECD442E）
• 细胞因子释放：IL-4、IL-13水平（pg/mL，ELISA法）

交叉反应性分析：

• 交叉反应蛋白鉴定：乳胶与香蕉的交叉反应蛋白（LC-MS/MS法）
• IgE交叉结合试验：花粉与水果的交叉反应性（免疫层析法）
• 交叉过敏风险评估：青霉素与头孢菌素的交叉过敏（组胺释放试验，HR%≥50为阳性）

临床过敏反应验证：

• 药物激发试验：口服/皮内注射后过敏症状评分（参照EMA指南）
• 斑贴试验：接触性皮炎评估（皮肤反应分级，参照ISO10933-10）
• 回顾性病例对照：过敏反应发生率对比（OR值≥2为关联）

辅料致敏性检测：

• 防腐剂致敏性：parabens类辅料的皮肤刺激指数（≤0.5为无刺激）
• 色素致敏性：诱惑红的皮肤致敏率（%，HRIPT试验）
• 赋形剂交叉反应：甘露醇与山梨醇的交叉过敏（IgE抗体检测）

生物制品免疫原性检测：

• 抗药物抗体（ADA）：总ADA滴度（≥1:100为阳性，ELISA法）
• 中和抗体（NAb）：抑制率（≥50%为阳性，细胞基于assay）
• 免疫复合物：循环免疫复合物（CIC）水平（μg/mL，比浊法）

药物代谢物致敏性分析：

• 代谢物IgE结合：青霉素代谢物青霉噻唑酸的IgE抗体滴度（kUA/L）
• 代谢物T细胞活化：磺胺代谢物的T细胞增殖率（%，CFSE法）
• 代谢物交叉反应：不同磺胺类药物代谢物的交叉过敏（组胺释放试验）

皮肤致敏性试验：

• 局部淋巴结assay（LLNA）：增殖指数（PI≥1.5为阳性，参照OECD429）
• 豚鼠最大化试验（GPMT）：致敏率（%，参照GB/T16886.10）
• 人体重复insultpatchtest（HRIPT）：致敏率（%，参照ISO10993-10）

呼吸道致敏性评估：

• 小鼠气道高反应性：OVA诱导的嗜酸性粒细胞计数（个/μL，支气管肺泡灌洗液）
• PBMC细胞因子谱：IL-5、IL-17水平（pg/mL，ELISA法）
• 吸入剂成分筛查：粉雾剂中乳糖载体的致敏潜力（LLNA法）

过敏反应生物标志物检测：

• 血清组胺：水平（≥100ng/mL为异常，荧光分光光度法）
• 类胰蛋白酶：浓度（≥11.5ng/mL提示过敏反应，化学发光法）
• 前列腺素D2代谢物：尿中PGD2-M水平（pg/mg肌酐，LC-MS/MS法）

检测范围

1.活性pharmaceuticalingredients（APIs）：包括化学合成药（青霉素类、磺胺类）、生物制品（单抗、重组胰岛素）、天然药物提取物（银杏叶、金银花提取物），重点检测其本身及代谢物的致敏潜力与交叉反应性。

2.药用辅料：包括防腐剂（parabens、苯扎氯铵）、赋形剂（乳糖、甘露醇）、色素（诱惑红、亮蓝）、崩解剂（交联聚维酮），重点筛查隐性过敏原及与API的协同致敏风险。

3.口服制剂：包括片剂（阿司匹林肠溶片）、胶囊剂（头孢呋辛酯胶囊）、颗粒剂（小儿氨酚黄那敏颗粒），重点评估辅料与API的联合致敏性及临床过敏反应相关性。

4.注射剂：包括静脉注射剂（生理盐水、紫杉醇注射液）、肌肉注射剂（青霉素G钠注射液）、皮下注射剂（胰岛素注射液），重点检测过敏原成分及免疫原性（如ADA）。

5.外用制剂：包括软膏（氢化可的松乳膏）、乳膏（皮炎平软膏）、贴剂（芬太尼透皮贴），重点评估皮肤致敏性（如LLNA、HRIPT）及接触性皮炎风险。

6.生物制品：包括疫苗（新冠疫苗、流感疫苗）、基因治疗药物（腺病毒载体药物）、细胞治疗产品（CAR-T细胞），重点检测免疫原性（ADA、NAb）及交叉过敏反应（如疫苗中的明胶成分）。

7.中药制剂：包括饮片提取物（人参皂苷、黄芪多糖）、中成药（连花清瘟胶囊、复方丹参滴丸），重点筛查天然过敏原（花粉、动物源性成分）及炮制过程中产生的致敏物质。

8.儿童用药：包括糖浆剂（小儿止咳糖浆）、混悬剂（布洛芬混悬液）、滴剂（维生素D滴剂），重点检测常见儿童过敏原（牛奶、鸡蛋成分）及低剂量致敏潜力。

9.特殊人群用药：包括孕妇用药（钙剂、叶酸片）、免疫缺陷患者用药（免疫抑制剂、生物制品）、老年用药（降压药、降糖药），重点评估交叉反应性及低阈值过敏风险。

10.仿制药/一致性评价药物：包括仿制药API（奥美拉唑）、制剂（阿莫西林胶囊），重点对比原研药的致敏性差异（过敏原成分含量偏差、免疫原性）。

检测方法

国际标准：

• OECD429:2019皮肤致敏性：局部淋巴结assay（LLNA）
• OECD442E:2018体外致敏性评估：树突状细胞/T细胞共培养assay
• ISO10933-2:2019过敏原检测：免疫层析法
• ASTME2018-18生物制品中免疫原性检测：酶联免疫吸附试验（ELISA）
• ICHS8:2006生物制品安全性评价：免疫原性研究

国家标准：

• GB/T21703-2008乳与乳制品中过敏原成分检测：实时荧光PCR法（适用于药品中乳类辅料过敏原筛查）
• GB/T38164-2019食品中过敏原成分检测：液相色谱-串联质谱法（适用于药品中隐性过敏原定量）
• YY/T1581-2018生物制品中过敏原蛋白检测：酶联免疫吸附试验（ELISA）
• GB/T16886.10-2017医疗器械生物学评价：皮肤致敏性试验（豚鼠最大化试验，适用于外用药品）
• 《药物临床试验质量管理规范》（GCP）：临床过敏反应激发试验指导原则

国际标准OECD429的LLNA采用小鼠淋巴结增殖指数，符合3R原则（减少、替代、优化），适用于早期筛选；国家标准GB/T16886.10的豚鼠最大化试验更接近临床皮肤反应，适用于外用药品的最终验证。ISO10933-2的免疫层析法快速便捷（15分钟出结果），适用于现场筛查；GB/T38164的LC-MS/MS法准确定量（检测限≤0.1ng/mL），适用于争议样品的确认。ASTME2018的ELISA法是生物制品免疫原性检测的金标准，而ICHS8则指导生物制品的长期免疫原性监测。

检测设备

1.酶联免疫分析仪：ThermoScientificMultiskanFC（检测范围0.001-4.000OD，精度±0.005OD，支持8通道同时检测）

2.实时荧光PCR仪：AppliedBiosystems7500Fast（荧光通道4色，检测灵敏度≤10copies/μL，扩增效率90%-110%）

3.液相色谱-串联质谱仪：Agilent1290InfinityII+6470TripleQuad（分辨率≥10,000FWHM，检测限≤0.1ng/mL，扫描速度≥1000Da/s）

4.流式细胞仪：BDFACSCantoII（检测通道8色，分选纯度≥98%，每秒获取≥10,000个细胞）

5.激光共聚焦显微镜：LeicaTCSSP8（分辨率≤150nm，扫描速度≥4frames/s，支持多光子激发）

6.全自动生化分析仪：RocheCobas8000（检测速度≥1600tests/h，重复性CV≤1.0%，支持多种试剂套餐）

7.皮肤电测仪：Courage&KhazakaMPA5（测量范围0-2000Ω，精度±1%，探头接触压力恒定）

8.过敏原检测仪：PhadiaImmunoCAP100（检测项目≥100种，灵敏度≤0.1kUA/L，批内变异系数≤5%）

9.细胞培养箱：ThermoScientificForma3111（CO2浓度控制±0.1%，温度±0.1℃，相对湿度≥95%）

10.高速离心机：Eppendorf5810R（最大转速15,000rpm，最大相对离心力21,500×g，支持4℃冷却）

11.超低温冰箱：SanyoMDF-U5386S（温度范围-86℃~-40℃，容量538L，温度波动≤±1℃）

12.生物安全柜：ESCOA2-3020（洁净等级ISO5，下降气流速度0.38m/s，流入气流速度0.5m/s）

13.显微镜：OlympusBX53（放大倍数40×-1000×，数值孔径1.40，支持相差显微镜观察）

14.电子天平：MettlerToledoXS205DU（最大称量220g，可读性0.01mg，重复性≤0.02mg）

15.高效液相色谱仪：Waterse2695（流速范围0.001-10.000mL/min，压力上限15,000psi，支持梯度洗脱）

16.化学发光免疫分析仪：BeckmanCoulterAccess2（检测范围0.001-1000ng/mL，灵敏度≤0.01ng/mL，批间变异系数≤5%）

17.荧光分光光度计：ShimadzuRF-6000（激发波长200-900nm，发射波长200-900nm，检测限≤0.1ng/mL）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"药品致敏性检测分析"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。