检测项目
1.菌核密度测定:测量单位体积土壤中菌核数量(个/g),粒径0.5-2.0mm
2.菌丝生长速率分析:25℃条件下测量菌落扩展速度(mm/24h)
3.致病性验证:采用离体叶片接种法测定病斑直径(≥10mm为阳性)
4.土壤pH值检测:电极法测定酸碱度范围4.0-7.5
5.有机质含量测定:重铬酸钾氧化法测定含量阈值≥1.5%
检测范围
1.悬铃木叶片样本:采集典型黄化萎蔫病叶
2.茎干组织样本:选取基部褐色腐烂病健交界处
3.根系样本:截取直径≤5mm的细根段
4.土壤样本:树冠投影范围内0-30cm土层混合样
5.周边植物样本:半径10m内易感植物(如豆科作物)
检测方法
1.病原菌分离:依据GB/T35337-2017《植物病原真菌分离规程》
2.形态学鉴定:参照ISO21527-2:2008酵母菌和霉菌计数方法
3.分子生物学检测:采用GB/T38581-2020真菌ITS区PCR扩增方案
4.土壤分析:执行LY/T1229-1999森林土壤pH测定标准
5.病害分级:依据ASTMD7444-18植物病害严重度目测评估指南
检测设备
1.PCR扩增仪:AppliedBiosystemsVeritiPro(ITS基因扩增)
2.体视显微镜:OlympusSZX16(菌核形态观察40-100)
3.恒温培养箱:MemmertIPP110(251℃真菌培养)
4.pH计:METTLERTOLEDOSevenExcellence(精度0.01)
5.超净工作台:ESCOAirstreamClassIIB2型(无菌操作)
6.离心机:Eppendorf5430R(最大转速30,000rpm)
7.凝胶成像系统:Bio-RadChemiDocMP(DNA条带分析)
8.自动灭菌锅:YamatoSM510(121℃高压灭菌)
9.电子天平:SartoriusCPA225D(精度0.01mg)
10.土壤筛分仪:RetschAS200control(2mm孔径分级)