可送检的样品类型与对应检测项目

样品类型 典型应用场景 主要检测项目 常用方法 / 参考
荧光标记配体与蛋白结合体系 受体结合分析、抑制剂筛选、亲和力排序 结合各向异性增量、解离常数Kd、半数抑制浓度IC50、竞争结合曲线 荧光偏振均相结合法，多功能酶标仪偏振模式，仪器按JJG 537-2006检定校准
膜脂质体与脂质模拟膜体系 膜流动性评估、膜微黏度测定、脂质相变研究 稳态各向异性r值、膜有序度参数、相变温度、微黏度 DPH或TMA-DPH膜探针法，激发360nm发射430nm，变温扫描
酶与荧光底物反应体系 蛋白酶、糖苷酶、磷酸酶活性测定与动力学分析 酶活性单位、米氏常数Km、最大反应速率Vmax、时间进程曲线 荧光标记底物时间进程法，稳态各向异性连续追踪底物裂解
荧光标记寡核苷酸杂交体系 序列识别评估、分子信标性能验证 杂交各向异性增量、解链温度Tm、标记效率 荧光素标记探针杂交法，探针工作浓度1-10nmol/L
蛋白质溶液与生物制剂 聚集监测、变性动力学、热稳定性评估 各向异性随温度变化曲线、聚集起始温度、变性速率常数 变温稳态扫描法，升温速率0.5-1℃/min，样品离心澄清后进样
荧光染料与探针溶液 探针研制表征、染料批次质量核对 基础各向异性、荧光强度、发射峰位、光稳定性 荧光分光光度计偏振附件测量，甘油水梯度体系校核旋转效应

检测项目

1. 稳态荧光各向异性r值：量程0-0.400，经G因子校正后重复测量RSD≤2%

2. 偏振度P：按P=2r/(3-r)换算，量程0-0.280，用于探针性能比对

3. 结合解离常数Kd：测定范围10⁻¹⁰-10⁻⁶mol/L，非线性拟合决定系数R²≥0.98

4. 膜微黏度与有序度：DPH探针r值典型范围0.05-0.35，控温精度±0.1℃

5. 酶动力学参数：Km测定范围10⁻⁶-10⁻³mol/L，时间分辨率≤1s

6. 时间分辨各向异性：旋转相关时间测定范围0.1-100ns，脉冲激发脉宽≤100ps

检测范围

1. 荧光标记蛋白与多肽：FITC、罗丹明B、丹磺酰氯等标记物，标记比1-5mol/mol

2. 脂质体与模拟膜：DOPC、DPPC及胆固醇梯度膜体系，粒径50-200nm

3. 荧光标记寡核苷酸：荧光素或花菁染料标记探针，长度15-50碱基

4. 荧光染料与探针溶液：荧光素、萘酰亚胺、BODIPY类染料，浓度10⁻⁹-10⁻⁵mol/L

5. 高通量筛选样品：96孔或384孔板均相结合分析样品，单孔体积20-200μL

检测方法

1. JJG 537-2006 荧光分光光度计检定规程，偏振测量条件确认与仪器校准

2. GB/T 27025-2019 检测和校准实验室能力的通用要求，方法验证与质量控制

3. GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法，一级用水配制探针与缓冲液

4. GB 19489-2008 实验室 生物安全通用要求，生物源样品前处理与操作规范

5. ISO/IEC 17025:2017 检测和校准实验室能力的通用要求，国际互认质量体系

检测设备

1. 荧光分光光度计（偏振附件）：激发波长200-900nm，水拉曼峰信噪比≥100:1，G因子自动校正

2. 荧光偏振分析仪：偏振分辨率0.001mP量级，重复读数RSD≤1%，毫秒级单点采集

3. 多功能酶标仪（偏振检测模块）：适配96孔与384孔板，荧光素通道激发485nm发射528nm，单孔读数≤1s

4. 时间分辨荧光光谱仪：时间相关单光子计数模块，脉冲脉宽≤100ps，时间通道分辨率≤50ps

5. 恒温样品池支架：控温范围5-60℃，精度±0.1℃，变温扫描速率0.1-5℃/min

6. 紫外-可见分光光度计：波长范围190-1100nm，吸光度精度±0.001Abs，标记物定量与标记比核定

7. 高速冷冻离心机：最高转速≥15000r/min，样品澄清与颗粒物去除

8. 超纯水系统：出水电阻率18.2MΩ·cm，满足GB/T 6682-2008一级水要求

9. 自动移液工作站：量程0.5-1000μL，移液精度CV≤1%，适配微孔板高通量加样