可送检的样品类型与对应检测项目

样品类型 典型应用场景 主要检测项目 常用方法 / 参考
贫血小板血浆（PPP） 凝血液联反应基础评价、抗凝药物体外药效研究 延迟时间、凝血酶峰值、达峰时间、内源性凝血酶潜力（ETP）、曲线形态学参数 荧光底物法动力学监测，按WS/T 359-2011规范采血与两次离心制备
富血小板血浆（PRP） 血小板促凝活性评价、抗血小板药物研究 血小板依赖性凝血酶生成、峰值与ETP变化幅度、浓度梯度效应 荧光底物法，血小板计数调节至150×10⁹/L后测定
药物孵育血浆 肝素、低分子肝素、Xa因子抑制剂、凝血酶抑制剂等剂量-效应评价 峰值抑制率、ETP抑制率、延迟时间延长幅度 荧光底物法结合发色底物法交叉验证
凝血因子类制剂评价样品 重组凝血因子、凝血酶原复合物等制剂促凝活性表征 ETP恢复率、峰值恢复率、时效曲线变化 荧光底物法动力学曲线分析
动物模型血浆 小鼠、大鼠、兔等血栓模型与出血模型药理研究 种属间凝血酶生成谱比较、造模前后ETP变化 荧光底物法小体积孔板适配
冻存血浆生物样品 生物样本库批量复测、保存稳定性考察 冻融次数对ETP与峰值的影响、批间一致性 WS/T 359-2011结合超低温保存质控

检测项目

1. 内源性凝血酶潜力（ETP）：凝血酶生成曲线下面积，报告范围50-3000 nM·min，分辨率1 nM·min

2. 凝血酶峰值：报告范围5-500 nM，分辨率0.1 nM，表征凝血酶生成最大浓度

3. 延迟时间：报告范围0.1-30 min，分辨率0.1 min，反映启动阶段凝血因子激活效率

4. 达峰时间：报告范围1-60 min，表征凝血酶生成与消耗的动态平衡

5. 曲线尾部参数：尾部起始时间10-90 min，支持60-120 min全程动力学监测

检测范围

1. 人血浆样品：109 mmol/L枸橼酸钠抗凝PPP与PRP两种制备体系

2. 科研药物评价样品：抗凝药物、促凝药物、凝血因子制剂孵育血浆

3. 动物血浆：小鼠、大鼠、兔、比格犬等临床前研究样品

4. 生物制品：重组凝血因子制剂、凝血酶原复合物等促凝活性评价对象

5. 冻存生物样品：-80℃深低温保存的血浆样本库样品

检测方法

1. WS/T 359-2011 血浆凝固实验血液标本的采集及处理指南，规定109 mmol/L枸橼酸钠1:9抗凝与血浆制备要求

2. 荧光底物法（校准自动凝血酶图谱法） Z-Gly-Gly-Arg-AMC荧光底物，激发390nm、发射460nm，α2-巨球蛋白内参校准

3. 发色底物法 S2238显色肽底物405nm分光光度定量凝血酶酰胺酶活性，用于交叉验证

4. ISO/IEC 17025:2017 检测和校准实验室能力的通用要求，方法验证、校准溯源与质量控制框架

5. 凝固法联合参比 PT、APTT与纤维蛋白原（Clauss法）同步测定，交叉印证样品凝血状态

检测设备

1. 全自动荧光凝血酶生成分析系统：96孔板，37±0.1℃温控，荧光采集间隔10-20s，监测时长60-120min

2. 多功能荧光酶标仪：激发390nm、发射460nm，动力学连续读数，温控精度±0.2℃

3. 全自动血凝分析仪：磁珠法与光学法双通道，PT、APTT、纤维蛋白原及凝血因子活性联测

4. 发色底物检测系统：405nm光度测定结合37℃恒温控制，凝血酶活性定量

5. 低温高速离心机：4℃、300-3000×g可调，满足PPP两次离心制备要求

6. 全自动血细胞分析仪：血小板计数范围1-1000×10⁹/L，PRP浓度调节质控

7. 恒温混匀仪：温控4-100℃，振荡速度300-1500rpm

8. 超低温冰箱：-86℃深低温血浆样品保存

9. 精密移液工作站：量程0.5-1000μL，加样重复性CV≤1%