可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法 / 参考 |
|---|---|---|---|
| 血清与血浆样本 | 临床队列研究、生物标志物筛选、样本库长期储存稳定性监控 | SOD活性、MDA含量、8-羟基脱氧鸟苷、蛋白浓度与活性回收率、核酸片段完整性 | GB/T 39766-2021《人类生物样本库管理规范》、GB/T 43731-2024《生物样本库中生物样本处理方法的确认和验证通用要求》;比色法与液质联用定量 |
| 冻存细胞样本(细胞系、原代细胞、干细胞) | 细胞库传代与冻存老化评估、干细胞库质量控制、复苏后功能验证 | 细胞活率与复苏率、衰老相关β-半乳糖苷酶活性、端粒长度、倍增时间、ROS水平 | GB/T 42466-2023《生物样本库 多能干细胞管理技术规范》、ISO 20387:2018(生物样本库通用要求) |
| 组织样本(新鲜冰冻、石蜡包埋、固定组织) | 组织库储存质量评估、病理样本回顾性研究、分子病理前置质控 | 核酸完整性RIN/DIN值、脂质过氧化水平、组织形态学完好性、蛋白可提取性 | GB/T 39767-2021《人类生物样本管理规范》、GB/T 40364-2021《人类生物样本库基础术语》 |
| 微生物菌种样本 | 菌种保藏库定期活性监测、复苏传代稳定性考察、污染控制验证 | 活菌计数、复苏率、菌落形态与遗传稳定性、质粒保持率 | SN/T 2632-2010《微生物菌种常规保藏技术规程》、SN/T 2660-2010《食品微生物实验室菌种保藏方法》 |
| 核酸与蛋白提取物 | 分子实验前置质控、冻存中间品稳定性考察、反复冻融耐受性评价 | A260/A280纯度比值、片段分布、酶活性残留、反复冻融后活性损失率 | 分光光度法、毛细管电泳、凝胶电泳通用方法体系(参照GB/T 43731-2024完成方法确认) |
| 其他体液样本(尿液、唾液、脑脊液等) | 队列样本库入库前质控、低温储存期间目标分析物稳定性追踪 | 目标代谢物回收率、pH、渗透压、浊度、微生物污染水平 | WS/T 442-2024《临床实验室生物安全指南》、GB/T 40364-2021(术语与分类参照) |
检测项目
1. 细胞活率:台盼蓝拒染法或流式细胞术测定,新鲜制备样本一般要求活率不低于90%,冻存复苏样本不低于85%
2. 核酸完整性:RNA按RIN值1~10分级评估,研究级样本一般要求RIN不低于7;DNA按DIN值或片段分布评估
3. 氧化应激指标:SOD酶活性(可按GB/T 41906-2022执行)、MDA含量(nmol/mL量级)、8-羟基脱氧鸟苷(pg/mL至ng/mL量级)
4. 端粒长度:qPCR法测定端粒与单拷贝基因T/S比值,或末端限制性片段法测定以碱基对计的端粒长度分布
5. 蛋白活性回收率:冻存前后目标蛋白活性比值,一般要求回收率不低于80%,同时监测聚集体增加比例
6. 反复冻融稳定性:分装样本经历1~3次冻融循环,目标指标损失率一般控制在10%以内
检测范围
1. 血清与血浆:临床研究队列样本、生物标志物研究样本、药代研究配套样本
2. 细胞类样本:传代细胞系、原代培养细胞、多能干细胞、免疫细胞治疗中间品
3. 组织类样本:新鲜冰冻组织、OCT包埋组织、石蜡包埋组织、固定组织块
4. 菌种类样本:细菌、真菌、放线菌、支原体等保藏菌株与工程菌
5. 提取物类样本:基因组DNA、总RNA、小RNA、纯化蛋白溶液与酶制剂
6. 其他体液:尿液、唾液、脑脊液、胸腔积液等低丰度分析物体液样本
检测方法
1. GB/T 39766-2021 人类生物样本库管理规范
2. GB/T 43731-2024 生物样本库中生物样本处理方法的确认和验证通用要求
3. GB/T 41906-2022 超氧化物歧化酶活性检测方法
4. GB/T 42466-2023 生物样本库 多能干细胞管理技术规范
5. GB/T 39767-2021 人类生物样本管理规范
6. ISO 20387:2018 生物技术 生物样本库 通用要求
7. SN/T 2632-2010 微生物菌种常规保藏技术规程
检测设备
1. 气相液氮冻存系统:储存温度-190℃以下,液位自动监控与缺液报警,样本独立存取
2. 超低温冰箱:-86℃双压缩机级联制冷,温度均匀性优于±5℃,配连续温度记录
3. 程序降温仪:降温速率0.1~10℃/min可编程,梯度冻存曲线设定
4. 毛细管电泳生物分析仪:RIN/DIN完整性评估,片段分辨范围1~60000bp
5. 荧光定量PCR仪:96孔或384孔,温控均一性±0.25℃,端粒T/S比值测定
6. 多功能酶标仪:波长200~1000nm,吸光、荧光、化学发光三模式,SOD与MDA比色定量
7. 流式细胞仪:双激光及以上配置,细胞活率、凋亡与ROS水平多参数检测
8. 三重四极杆液质联用仪:8-羟基脱氧鸟苷与MDA痕量定量,检出限达pg/mL级
9. 自动细胞计数仪:台盼蓝与荧光双通道,活率计数重复性优于±2%
10. 大容量冷冻离心机:温控范围-20~40℃,最大相对离心力20000×g以上