制药工艺用水微生物含量检测

检测项目

微生物总数检测：

• 总需氧菌计数：<100CFU/mL（参照USP<61>）
• 总酵母菌和霉菌计数：<10CFU/mL（参照EP2.6.12）
• 生物负载评估：动态监测菌落形成单位（CFU）

特定病原菌筛查：

• 大肠菌群检测：定性分析，无检出（参照ISO9308-1）
• 沙门氏菌检测：选择性培养法，阴性结果（参照ChP1105）
• 铜绿假单胞菌检测：膜过滤验证，<1CFU/100mL

内毒素及热原检测：

• 内毒素水平：<0.25EU/mL（参照USP<85>）
• 细菌内毒素测试：动态浊度法（参照EP2.6.14）
• 热原限度验证：兔法或LAL替代法

无菌测试项目：

• 注射用水无菌性：直接接种法，无菌生长（参照ISO11737-1）
• 微生物复苏试验：挑战测试，复苏率≥70%

生物膜检测：

• 表面生物膜定量：ATP生物发光法，RLU值<100
• 生物膜形成评估：培养基附着测试（参照ASTME2562）

水质化学辅助检测：

• 总有机碳（TOC）：<500ppb（参照USP<643>）
• 电导率：<1.3µS/cm（25°C）
• pH值范围：5.0-7.0

采样方法验证：

• 采样点代表性：随机分布验证（参照ISO5667-3）
• 样品保存条件：冷藏4°C，时效≤24h

微生物鉴定：

• 菌种鉴定：16SrRNA测序（参照ISO15216-1）
• 耐药性测试：最小抑菌浓度（MIC）测定

环境监测整合：

• 空气微生物沉降：<1CFU/4h（参照ISO14698-1）
• 表面擦拭测试：接触碟法，<5CFU/25cm²

趋势分析项目：

• 微生物数据统计：控制图分析（参照ISO7870-2）
• 警戒限设定：基于历史数据，±2SD

检测范围

1.纯化水：用于非无菌制剂生产和设备清洁，重点检测总需氧菌计数、电导率和TOC水平，确保化学纯度与微生物控制。

2.注射用水：高温蒸馏或反渗透制备，强调无菌测试、内毒素限度和生物负载监测，保障注射剂安全性。

3.清洁用水：设备冲洗和场地消毒用水，检测大肠菌群和酵母菌，重点防止交叉污染。

4.工艺用水储存系统：储罐和管道内壁，聚焦生物膜检测和定期微生物采样，控制滞留时间影响。

5.分配系统：循环管路和阀门，评估微生物复苏和趋势分析，确保流动水无生物积累。

6.点-of-use样品：生产设备出水口直接采样，侧重特定病原菌筛查和采样方法验证。

7.原水预处理系统：进水前处理阶段，检测总微生物计数和化学参数，作为初始质量控制点。

8.再生水系统：回收利用水，重点内毒素检测和TOC监控，评估再利用安全性。

9.制药设备接触水：反应釜或灌装线用水，进行无菌测试和微生物鉴定，防止设备污染。

10.灭菌水成品：终端灭菌水产品，验证无菌性和热原限度，确保最终使用合规。

检测方法

国际标准：

• USP<61>微生物计数测试（膜过滤法，需氧菌培养30-35°C）
• EP2.6.12微生物污染检测（显色培养基法，酵母菌培养25-30°C）
• ISO11737-1无菌测试（直接接种，培养14天）
• ISO9308-1大肠菌群检测（多管发酵法，44.5°C培养）
• ASTME2562生物膜定量（ATP生物发光，RLU校准）

国家标准：

• ChP1105微生物限度检查（倾注平板法，培养48h）
• GB/T5750.12生活饮用水微生物检测（滤膜法，37°C培养）
• GB/T14233.2注射用水内毒素测试（动态显色法，37°C孵育）
• GB/T4789.3大肠菌群测定（MPN法，选择性培养基）
• GB/T15441水质生物毒性检测（发光细菌法）

方法差异说明：国际标准如USP优先膜过滤法采样体积100mL，国家标准GB/T5750采用滤膜法但采样体积50mL；培养温度国际标准要求30-35°C用于总需氧菌，国家标准GB/T4789.3使用37°C；内毒素测试国际LAL法灵敏度0.01EU/mL，国家标准GB/T14233.2灵敏度0.03EU/mL。

检测设备

1.微生物培养箱：MemmertIN110型（温度范围5-70°C，精度±0.3°C）

2.PCR扩增仪：Bio-RadCFX96型（检测限0.1CFU/mL，升温速率4°C/s）

3.内毒素检测仪：CharlesRiverEndosafe型（检测范围0.001-10EU/mL，响应时间10min）

4.膜过滤装置：MilliporeStericup型（孔径0.22µm，流速100mL/min）

5.自动菌落计数器：Scan1200型（分辨率1mm，计数速度200皿/h）

6.生物安全柜：EscoAirstream型（洁净度Class100，风速0.5m/s）

7.倒置显微镜：OlympusIX73型（放大倍数40-1000X，LED光源）

8.水质分析仪：HachHQ40D型（TOC检测限1ppb，电导率范围0-2000µS/cm）

9.恒温振荡器：ThermoMaxQ4000型（转速50-400rpm，温度控制±0.5°C）

10.无菌采样瓶：Nalgene500mL型（材质硼硅玻璃，无菌保证期12月）

11.离心机：Eppendorf5430R型（转速300-15000rpm，容量4x100mL）

12.光度计：ShimadzuUV-1900型（波长范围190-1100nm，精度±0.5nm）

13.电导率仪：MettlerToledoS230型（量程0.01-200mS/cm，自动温度补偿）

14.TOC分析仪：GESievers900型（检测范围0.5-5000ppb，氧化率99.9%）

15.生物反应监测器：SartoriusBiostat型（pH控制5.0-9.0，溶氧监测0-100%）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"制药工艺用水微生物含量检测"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。