检测项目
1.形态特征检测:体长0.8-1.2mm测量精度0.05mm;前翅脉纹比对误差≤3%;后足胫节刺数量统计(标准值5-7根)
2.DNA条形码分析:COI基因片段扩增(658bp);序列相似度≥98%判定为同种
3.若虫龄期判定:依据腹节毛序排列模式(第3-4腹节毛簇数≥8组)
4.抗药性基因检测:ace1基因突变位点筛查(F290V突变频率测定)
5.种群密度监测:单位面积捕捉量统计(标准网捕法30cm40cm网具)
检测范围
1.水稻植株样本(叶片基部卵块分布区)
2.仓储谷物表层虫体分离物
3.迁飞种群高空诱捕样本(海拔50-100m捕获物)
4.土壤越冬若虫复苏样本(深度5-10cm土层)
5.跨境植物检疫截获标本(口岸入境货物附着物)
检测方法
ISO21772:2018半翅目昆虫分子鉴定规范(COI基因扩增程序)
GB/T28084-2011水稻害虫形态鉴定技术规程
ASTME1752-08昆虫抗药性生物测定标准方法
NY/T3088-2017飞虱科种群监测技术规范
SN/T5108-2019入境植物检疫中飞虱属快速筛查方法
检测设备
1.LeicaM205C体视显微镜:20.5:1变倍比,0.8x-16x放大范围
2.Bio-RadT100PCR仪:96孔模块0.3℃温控精度
3.Agilent4200TapeStation系统:DNA完整性指数(DIN)测定
4.OlympusBX53荧光显微镜:DP80双摄像头同步成像系统
5.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪:3激光13色配置
6.SartoriusCP225D电子天平:0.01mg分辨率(虫体称重)
7.ThermoScientificHeratherm培养箱:温度波动0.2℃(若虫饲养)
8.NikonSMZ25变倍体视镜:25:1变倍比带16MP相机
9.IlluminaMiSeq测序仪:2300bp双端读长模式
10.LabconcoPurifierLogic+生物安全柜:ClassIIA2型(活体操作)