检测项目

1.孢子形态鉴定:测量冬孢子直径(18-24μm)、网纹高度(1.5-2.5μm)、胶鞘厚度(2-3μm)

2.实时荧光定量PCR:靶标基因为ITS区域(GenBank登录号AY040335),灵敏度≥10copies/μL

3.致病性试验:接种小麦幼苗(品种京9428),温度梯度4-15℃,观察期21天

4.脂肪酸甲酯分析:采用MIDISherlock系统,匹配TSBA6.21数据库相似度>0.8

5.ELISA血清学检测:抗体效价≥1:64000,交叉反应率<0.1%

检测范围

1.进口/出口小麦种子(包括硬粒小麦、普通小麦)

2.田间土壤样本(耕作层0-20cm)

3.小麦加工副产品(麸皮、次粉等)

4.植物检疫截获物(仓储害虫携带物)

5.科研用菌株保藏物(冻干菌种、斜面培养物)

检测方法

ISO6322-1:2000《谷物与豆类隐蔽性害虫检测第1部分:常规方法》

GB/T28071-2011《小麦矮化腥黑穗病菌检疫鉴定方法》

SN/T1135.1-2016《植物病原真菌检疫鉴定方法》

EPPOPM7/24(2)Tilletiacontroversa诊断规程

USDAAPHISPPQ协议CPHST-BL-03-02

检测设备

OlympusBX53荧光显微镜:配备DP27相机,100油镜观察孢子超微结构

ThermoFisherQuantStudio5实时荧光PCR仪:支持TaqMan探针法扩增

SartoriusME36S电子天平:量程0.001g-220g,符合ISO/IEC17025校准规范

ESCOA2型生物安全柜:二级防护等级,HEPA过滤效率99.99%

MemmertIPP110培养箱:温度控制精度0.3℃,湿度范围10-90%RH

BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪:配置488nm/638nm双激光系统

Agilent7890B气相色谱仪:配备FID检测器,用于脂肪酸谱分析

BioTekELx808微孔板洗板机:96孔板处理时间<60秒/次

LeicaCM1950冷冻切片机:切片厚度调节范围1-100μm

MilestoneETHOSUP微波消解仪:40位转子容量,最高温度300℃