检测项目

1.孢子形态鉴定：测量冬孢子直径（18-24μm）、网纹高度（1.5-2.5μm）、胶鞘厚度（2-3μm）

2.实时荧光定量PCR：靶标基因为ITS区域（GenBank登录号AY040335），灵敏度≥10copies/μL

3.致病性试验：接种小麦幼苗（品种京9428），温度梯度4-15℃，观察期21天

4.脂肪酸甲酯分析：采用MIDISherlock系统，匹配TSBA6.21数据库相似度＞0.8

5.ELISA血清学检测：抗体效价≥1:64000，交叉反应率＜0.1%

检测范围

1.进口/出口小麦种子（包括硬粒小麦、普通小麦）

2.田间土壤样本（耕作层0-20cm）

3.小麦加工副产品（麸皮、次粉等）

4.植物检疫截获物（仓储害虫携带物）

5.科研用菌株保藏物（冻干菌种、斜面培养物）

检测方法

ISO6322-1:2000《谷物与豆类隐蔽性害虫检测第1部分：常规方法》

GB/T28071-2011《小麦矮化腥黑穗病菌检疫鉴定方法》

SN/T1135.1-2016《植物病原真菌检疫鉴定方法》

EPPOPM7/24(2)Tilletiacontroversa诊断规程

USDAAPHISPPQ协议CPHST-BL-03-02

检测设备

OlympusBX53荧光显微镜：配备DP27相机，100油镜观察孢子超微结构

ThermoFisherQuantStudio5实时荧光PCR仪：支持TaqMan探针法扩增

SartoriusME36S电子天平：量程0.001g-220g，符合ISO/IEC17025校准规范

ESCOA2型生物安全柜：二级防护等级，HEPA过滤效率99.99%

MemmertIPP110培养箱：温度控制精度0.3℃，湿度范围10-90%RH

BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪：配置488nm/638nm双激光系统

Agilent7890B气相色谱仪：配备FID检测器，用于脂肪酸谱分析

BioTekELx808微孔板洗板机：96孔板处理时间＜60秒/次

LeicaCM1950冷冻切片机：切片厚度调节范围1-100μm

MilestoneETHOSUP微波消解仪：40位转子容量，最高温度300℃