检测项目

1.菌核形态观察：菌核直径（0.5-15mm）、颜色（黑色至深褐色）、表面特征（粗糙/光滑）

2.病原菌分离培养：PDA培养基菌落直径（24h/48h）、菌丝生长速率（mm/d）、产孢量（孢子数/cm）

3.分子生物学鉴定：ITS序列比对（GenBank数据库）、SCAR标记特异性扩增（引物SS1/SS2）

4.致病性测定：离体叶片侵染斑直径（48h）、活体接种发病率（%）

5.抗药性分析：多菌灵EC50值（μg/mL）、嘧霉胺MIC值（mg/L）

检测范围

1.草莓植株叶片病斑组织样本

2.果实表面霉层及内部腐烂组织

3.根茎部维管束褐变样本

4.栽培基质及土壤中的越冬菌核

5.种苗携带的潜伏病原体

检测方法

ISO16140-3:2021《分子生物学方法验证指南》用于PCR扩增特异性验证

GB/T28068-2011《农作物病害诊断规程》规范病样采集与处理流程

ASTME1873-21《抗菌剂效力测试标准》指导抗药性试验设计

NY/T401-2000《真菌病害检测技术规范》规定菌核萌发试验条件

SN/T4283.2-2015《植物病原真菌实时荧光PCR检测方法》用于快速筛查

检测设备

1.Bio-RadT100ThermalCycler：用于SSUrRNA基因扩增程序控制（温度精度0.2℃）

2.OlympusBX53荧光显微镜：配备DP80双摄像头系统（分辨率40803072）

3.ThermoScientificHeratherm培养箱：温度控制范围4-70℃（波动度0.3℃）

4.SartoriusQuintix224-1CN分析天平：称量精度0.1mg（最大载荷220g）

5.EppendorfCentrifuge5910R：转速300-14,700rpm（温控范围-20-40℃）

6.ThermoNanoDropOne紫外分光光度计：核酸浓度测量范围2-27,500ng/μL

7.MemmertHPP750恒温恒湿箱：湿度控制范围10-98%RH（精度1%）

8.LI-COROdysseyCLx成像系统：双色红外荧光检测（700/800nm通道）

9.METTLERTOLEDOSevenExcellencepH计：测量精度0.002pH

10.BinderKBW系列生物安全柜：HEPA过滤器效率99.99%（EN12469认证）