可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法 / 参考 |
|---|---|---|---|
| 离体血管环（大鼠胸主动脉、肠系膜动脉、冠状动脉） | 血管活性药物筛选、降压类中药药效评价、内皮功能研究 | 去甲肾上腺素预收缩幅度、乙酰胆碱累积舒张曲线、最大效应Emax、EC50、去内皮平行对照 | 离体组织器官浴槽等长张力法，克氏液恒温37℃持续通混合气，四参数逻辑方程拟合 |
| 离体平滑肌标本（豚鼠回肠、大鼠子宫、膀胱逼尿肌、气管螺旋条） | 受体激动剂与拮抗剂鉴定、解痉药与平喘药筛选、平滑肌药理学研究 | 张力量效曲线、pD2、拮抗参数pA2、组胺或卡巴胆碱累积反应、Hill系数 | 器官浴槽等长张力记录，对数浓度累积给药法，每一浓度平衡后读取效应值 |
| 离体心脏标本（豚鼠心房、乳头肌、Langendorff灌流心脏） | 强心苷类效价测定、抗心律失常药物评价、心肌缺血再灌注研究 | 收缩幅度、收缩频率、左心室压、冠脉流量随浓度的变化关系、正性肌力量效曲线 | Langendorff恒压或恒流灌流，压力换能器与生物信号采集系统同步记录 |
| 细胞水平样品（原代肝细胞、血管内皮细胞、肿瘤细胞系） | 细胞毒性量效评价、抗肿瘤活性筛选、光毒性检测 | 存活率浓度曲线、IC50、抑制率、中性红摄取量、克隆形成率 | GB/T 16886.5-2017 MTT比色法，酶标仪490纳米比色，梯度稀释后拟合曲线 |
| 受试物溶液（中药提取物、化学小分子、多肽与蛋白类药物） | 新药成药性评价、保健功能因子功效确证、化合物活性排序 | 母液配制与溶剂载体对照、终浓度梯度设计、沉淀与稳定性观察、溶剂体积分数控制 | 二甲基亚砜母液配制，培养体系中溶剂终浓度体积分数不大于0.1% |
检测项目
1. 量效曲线拟合：四参数逻辑方程，拟合决定系数R平方不低于0.99
2. EC50与IC50测定：终浓度覆盖0.1纳摩尔至1毫摩尔每升，不少于8个浓度点
3. 最大效应Emax：以参照激动剂最大反应的百分比表示，通常在60%-100%之间
4. 拮抗参数pA2：Schild图斜率处于0.8-1.2方可判定为竞争性拮抗
5. Hill系数：0.8-1.5区间判断受体结合协同性与受体亚型参与情况
6. 平衡孵育时间：每一浓度点稳定15-30分钟后记录效应值
检测范围
1. 离体血管环：大鼠胸主动脉环、肠系膜动脉环，含保留内皮与去内皮平行对照
2. 离体平滑肌：豚鼠回肠、大鼠子宫平滑肌、膀胱逼尿肌、气管螺旋条
3. 离体心脏：豚鼠左右心房、乳头肌标本、Langendorff灌流心脏
4. 细胞样品：原代肝细胞、脐静脉内皮细胞、肿瘤细胞系与工程细胞株
5. 受试物类型：中药单体与提取物、化学合成小分子、多肽与核酸类药物
检测方法
1. GB/T 16886.5-2017 医疗器械生物学评价 第5部分：体外细胞毒性试验
2. ISO 10993-5:2009 体外细胞毒性试验（浸提液梯度稀释定量法）
3. OECD TG 432:2004 体外3T3中性红摄取光毒性试验
4. 《中华人民共和国药典》2020年版四部 生物检定统计方法（量反应平行线测定与四参数拟合）
5. USP 1034-2020 生物测定数据的统计分析（量效曲线拟合与效价计算）
检测设备
1. 离体组织器官浴槽系统：浴槽容积5-50毫升，温度37℃±0.5℃，持续通入95%氧气加5%二氧化碳混合气
2. 高灵敏度张力换能器：量程0-30毫牛，分辨率0.1毫牛
3. 生物信号采集系统：4-16通道，采样频率1000赫兹
4. 超级恒温水浴循环器：控温范围室温-60℃，波动度±0.1℃
5. Langendorff离体心脏灌流系统：恒压40-80厘米水柱或恒流1-10毫升每分钟
6. 二氧化碳培养箱：温度37℃，二氧化碳浓度5%，相对湿度95%
7. 倒置生物显微镜：相差物镜4倍-40倍，配置活细胞观察平台
8. 全波长酶标仪：波长范围200-1000纳米，吸光度分辨率0.001
9. 电子分析天平：量程0-220克，可读性0.01毫克
10. 多通道移液器：体积范围0.5-1000微升，加样精度优于±1%