方法名称 | 简介 | 优点 | 试用范围 | 局限性 |
Transwell实验 (透明质膜孔板法) |
通过透明质膜孔板模拟细胞迁移和侵袭,定量测量细胞数量 | 定量化测量细胞数量,高通量筛选 | 适用于体外细胞迁移和侵袭评估,高通量筛选等 | 无法模拟组织间的复杂环境,不适用于体内实验 |
Scratch实验 (划痕实验) |
在细胞培养皿中形成划痕,观察细胞填充划痕的能力 | 简单易行 | 适用于初步评估细胞迁移能力,简单易行 | 无法模拟体内环境,只能提供定性信息 |
Boyden室外实验 (Boyden室外迁移实验) |
利用孔板上下两室的梯度形成细胞迁移差异,评估细胞迁移能力 | 相对简单,不需要特殊设备 | 适用于体外细胞迁移评估,操作相对简单 | 不适用于定量测量,无法模拟复杂的体内情况 |
3D细胞迁移模型 (三维细胞迁移模型) |
使用三维结构模拟细胞迁移,贴近体内环境 | 贴近体内环境,更贴近真实情况 | 适用于模拟复杂的生理环境,更贴近体内情况 | 实验步骤复杂,需要特殊设备,较为耗时 |
软琼脂膜法 (软琼脂孔板法) |
在琼脂膜上培养细胞,观察细胞在软质基质上的迁移能力 | 适用于生物力学研究,模拟软组织环境 | 只能提供定性信息,不适用于定量测量 | 需要特殊琼脂膜基质和培养条件 |
体内实验 | 使用动物模型研究细胞迁移和侵袭过程,具有较高的生物学相关性 | 较高的生物学相关性,模拟复杂体内环境 | 适用于研究细胞在复杂体内环境下的行为 | 涉及动物实验,存在伦理和法规限制,费用较高 |
● 预处理透明质膜孔板:将透明质膜孔板浸泡在适当的溶液中,如无菌PBS或细胞培养基,去除可能的残留物质,确保透明质膜孔板的清洁和无菌。
● 细胞处理:将需要研究的细胞分散成单细胞悬浮液,根据实验需要,可预处理细胞,例如暴露于趋化因子或药物。
● 上室孔板装配:将预处理后的细胞悬浮液加入透明质膜孔板的上室,注意控制细胞数量和浓度,确保均匀分布。
● 下室孔板装配:在透明质膜孔板的下室中加入相应的培养基,通常含有趋化因子或其他试剂,以吸引细胞迁移或侵袭。
● 孔板培养:将上下室装配的透明质膜孔板置于细胞培养箱中,进行培养,根据研究需要,可以调节培养时间。
● 细胞固定和染色:培养结束后,取出透明质膜孔板,将细胞固定,通常使用甲醛或乙醇等,然后进行染色。
● 细胞观察和计数:观察透明质膜孔板上下室中的细胞,根据实验目的选择适当的染色方法进行细胞计数或其他定量分析。
● 数据分析:根据实验结果进行数据统计和分析,比较不同组别的细胞迁移或侵袭能力。
Transwell实验可以根据研究目的进行适当的调整和改进,实验步骤可能会因具体实验设计而有所差异。
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以上是与细胞迁移及侵袭能力实验相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。