检测项目
1.形态学鉴定:体长测量(0.8-1.2mm)、触角鞭节数(14-16节)、翅脉R4+5分叉角度(723)
2.基因序列分析:线粒体COI基因(658bp)、核糖体ITS2区域(450-500bp)
3.环境DNA定量:eDNA浓度(ng/μL)、扩增效率(90-110%)
4.生理生化指标:血淋巴蛋白含量(≥15mg/mL)、几丁质酶活性(U/mg)
5.抗药性监测:乙酰胆碱酯酶活性抑制率(≤30%)、GSTs酶比活力(μmol/min/mg)
检测范围
1.淡水生态系统沉积物样本(0-10cm层)
2.水生植物附着生物膜样本
3.人工培育第IV龄幼虫活体样本
4.成虫翅鞘显微切片标本
5.环境水体过滤残留物(0.45μm滤膜)
检测方法
ISO5667-3:2018《水质采样第3部分:水样保存与处理技术》
ASTMD3976-92(2019)《沉积物中生物群落分析标准指南》
GB/T35823-2018《昆虫抗药性检测技术规范》
ISO/IEC17025:2017《检测实验室通用要求》
GB/T34796-2017《水生生物DNA条形码技术规程》
检测设备
1.奥林巴斯BX53研究级显微镜(400成像/微分干涉功能)
2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪(TaqMan探针法)
3.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机(最大30,000g)
4.SartoriusCubisII分析天平(0.001mg分辨率)
5.IlluminaMiSeq基因测序平台(2300bp双端读长)
6.MiltenyiBiotecGentleMACS组织匀浆系统(程序化裂解协议)
7.Agilent4200TapeStation生物分析仪(DNA完整性评估)
8.LeicaEMCPD300临界点干燥仪(翅脉标本制备)
9.HachHQ40d多参数水质测定仪(DO/pH/EC同步监测)
10.ShimadzuUV-2600i分光光度计(核酸纯度A260/A280比值测定)