检测项目

1.病原菌分离培养：菌落直径（24-72h生长量）、菌丝直径（3-5μm）、产孢量（≥10^4孢子/mL）

2.叶片病斑特征分析：病斑直径（0.5-3.0mm）、边缘色度值（L*a*b*体系）、侵染密度（5-30个/cm）

3.分子生物学鉴定：ITS序列比对（相似度≥99%）、β-tubulin基因扩增（产物长度500-600bp）

4.孢子形态测量：分生孢子长度（12-18μm）、宽度（2.5-3.5μm）、隔膜数（3-5个）

5.抗药性测试：EC50值测定（苯醚甲环唑0.1-5.0μg/mL）、MIC值范围（多菌灵10-50ppm）

检测范围

1.黄肉楠属活体植株（树龄1-10年）

2.离体叶片样本（新鲜/干燥状态）

3.土壤基质（根际土深度0-20cm）

4.组培苗接种体（愈伤组织直径≥3mm）

5.园林废弃物堆肥（C/N比20:1-30:1）

检测方法

1.ISO21427:2018《植物病原真菌分离培养规范》

2.GB/T3543.5-1995《农作物种子检验规程病害检验》

3.ASTMD7990-15《植物病原分子检测标准指南》

4.GB/T36852-2018《林木病害分子检测技术规程》

5.ISO16198:2015《植物材料真菌毒素污染评估》

检测设备

1.OlympusBX53荧光显微镜：孢子形态观测（1000油镜）

2.ThermoScientificHeratherm微生物培养箱：温度控制0.5℃

3.Bio-RadT100PCR仪：温度均一性0.25℃

4.SartoriusCP225D电子天平：称量精度0.01mg

5.Eppendorf5920R高速离心机：最大转速20,000rpm

6.ThermoNanoDropOne紫外分光光度计：核酸浓度测定（2μL样本）

7.ZeissAxioScan.Z1全自动切片扫描系统：病斑面积计算精度0.01mm

8.MemmertHPP110恒温恒湿箱：湿度控制范围30-95%RH

9.Agilent1260InfinityIIHPLC：杀菌剂残留检测（检出限0.01ppm）

10.LeicaCM1950冷冻切片机：样本切片厚度10-30μm