检测项目
1.HPV分型检测:采用多重PCR技术筛查HPV5/8/20/47等20种高危亚型。
2.EVER1/EVER2基因测序:全外显子测序覆盖NM_153486.3(EVER1)和NM_175924.4(EVER2)基因。
3.组织病理学检查:HE染色观察角化过度、空泡细胞及颗粒层增厚特征。
4.免疫组化分析:使用CK10(1:200)、Ki-67(MIB-1克隆)抗体评估表皮分化状态。
5.电子显微镜检测:JEM-1400Flash透射电镜观察角质细胞核内病毒颗粒(分辨率0.25nm)。
检测范围
1.皮肤活检组织(厚度≥3mm)
2.EDTA抗凝外周血(全血≥2mL)
3.石蜡包埋病理切片(厚度4-5μm)
4.新鲜冷冻皮肤样本(保存温度-80℃)
5.口腔黏膜拭子(病毒载量≥10copies/mL)
检测方法
1.HPV分型:ISO20184-1:2020多重实时荧光PCR法
2.基因测序:IlluminaNovaSeq6000平台双端150bp测序(GB/T30988-2014)
3.病理诊断:WHO皮肤肿瘤分类第4版标准
4.免疫组化:GB/T37864-2019自动化染色质控规范
5.电镜观察:ASTME766-14标准校准程序
检测设备
1.Bio-RadCFX96实时荧光定量PCR仪(温度均一性0.2℃)
2.OlympusBX53病理显微镜(1000油镜NA1.40)
3.ThermoFisherIonS5XL二代测序仪(芯片密度2000万/run)
4.LeicaCM1950冰冻切片机(切片精度1μm)
5.RocheBenchMarkULTRA全自动染色机(抗体孵育0.5℃控温)
6.JEOLJEM-1400Flash透射电镜(加速电压120kV)
7.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机(最大RCF30,130g)
8.Agilent4200TapeStation核酸分析系统(DNA灵敏度0.1ng/μL)
9.MilestoneHISTOS5微波快速处理仪(温度控制1℃)
10.HamamatsuNanoZoomerS360数字病理扫描仪(40倍物镜扫描精度)