检测项目
1.结合亲和力(KD值):采用表面等离子体共振技术测定配体-受体结合平衡常数(10^-3~10^-12M)
2.解离常数(koff):通过生物膜干涉技术测量复合物解离速率(0.001~10s^-1)
3.结合位点数(n值):利用等温滴定量热法计算摩尔结合比(0.5~2.0)
4.热力学参数:包括焓变(ΔH200kJ/mol)和熵变(ΔS600J/molK)
5.空间构象变化:圆二色光谱法测定α螺旋含量变化(190-260nm波长范围)
检测范围
1.蛋白质-小分子复合物:单克隆抗体/重组蛋白与药物分子相互作用分析
2.核酸适配体体系:DNA/RNA适配体与靶标蛋白结合特性研究
3.细胞膜受体系统:GPCR受体与配体结合动力学特征解析
4.纳米载药体系:脂质体/聚合物纳米粒与药物负载能力评估
5.酶-底物复合物:催化活性中心与抑制剂结合模式表征
检测方法
ISO15197:2013免疫分析系统配基结合性能验证规范
ASTME2963-22表面等离子共振生物传感器标准测试方法
GB/T34826-2017核酸适配体结合力测试通用要求
ISO/TR19838:2016微量热法测定分子相互作用技术指南
GB/T39133-2020蛋白质相互作用分析用标准物质特性量值
检测设备
1.BiacoreT200:表面等离子体共振分析仪(SPR),实时监测结合动力学过程
2.MicroCalPEAQ-ITC:高灵敏度等温滴定量热仪(ITC),分辨率达0.1μcal/s
3.OctetRED384e:生物膜干涉仪(BLI),支持384孔板高通量筛选
4.JascoJ-1500:圆二色光谱仪(CD),波长范围163-2500nm
5.MalvernZetasizerUltra:动态光散射仪(DLS),粒径测量范围0.3nm-10μm
6.Agilent6495CQ-TOF:三重四极杆质谱仪(MS),质量精度<1ppm
7.NanoTemperMonolithX:微量热泳动仪(MST),样品消耗量<4μL
8.WyattDynaProNanoStar:动态光散射仪(DLS),温度控制精度0.1℃
9.PerkinElmerLambda365:紫外可见分光光度计(UV-Vis),波长精度0.1nm
10.BrukerAVANCENEO600:核磁共振波谱仪(NMR),磁场强度14.09T