检测项目
基础定量检测:
- 主要前列腺素总量:PGE2(检测限≤0.5pg/mL)、PGF2α(RSD≤8%)
- 血栓烷类:TXB2(线性范围0.1-500ng/mL)、6-keto-PGF1α(回收率≥92%)
- 炎症介质:PGE2/PGD2比值(参照AOCSCc7d-07)、15-deoxy-Δ12,14-PGJ2
- 代谢产物:13,14-dihydro-15-keto-PGE2(精密度CV≤5%)
- 羊水标志物:PGFM(8-iso-PGF2α≤35pg/mL)
- 精液质量:19-OHPGE(波动范围±0.3nmol/L)
- 血管活性因子:PGI2/TXA2平衡比(临界值≥0.8)
- 氧化应激指标:8-iso-PGF2α(阳性阈值>45pg/mgCr)
- 脑脊液特异项:PGE2(参考范围0.2-4.3pg/mL)
- 神经保护因子:Δ12-PGJ2(分离度R≥1.5)
- COX抑制剂效应:PGE2抑制率(≥80%为有效)
- NSAIDs代谢物:2,3-dinor-6-keto-PGF1α(保留时间±0.1min)
- 立体异构体:8-iso-PGF2αvsPGF2α(分辨率≥2.0)
- 位置异构体:PGE1/PGE2(质荷比差异0.2Da)
- 环氧化酶活性:PGG2→PGH2转化率(≥95%)
- 前列腺素合酶:PGIS特异性(交叉反应≤0.01%)
- 巨噬细胞分泌:LPS诱导PGE2释放量(≥500pg/10^6细胞)
- 上皮细胞代谢:PGE215-PGDH降解速率(k≥0.15/min)
- 样本稳定性:-80℃存储RSD≤7%(参照ISO17025)
- 衍生物稳定性:PFB酯半衰期≥48h(4℃)
检测范围
1.血清/血浆样本:检测游离态与结合态PGs比例,重点控制溶血干扰(Hb≤0.02g/dL)
2.组织匀浆液:涵盖心/肝/肾/脑组织,前处理强调磷酸酯酶抑制剂添加
3.细胞培养上清:适用于原代细胞及细胞系,检测COX-2诱导表达动态
4.尿液标本:侧重代谢产物如11-脱氢-TXB2,需肌酐校正(浓度/mgCr)
5.羊水/精液:生殖医学专项检测,控制pH在7.0-7.6范围
6.脑脊液:超微量检测(取样量≥100μL),避免血液污染(RBC≤100/μL)
7.药品制剂:前列腺素类药物含量测定(如米索前列醇纯度≥98.5%)
8.食品基质:功能性食品PGs活性检测,重点去除脂质干扰(过柱净化)
9.化妆品原料:植物提取物PGs类似物筛查(检出限≤10ng/g)
10.体外诊断试剂:ELISA试剂盒线性验证(R²≥0.990)
检测方法
国际标准:
- ISO17025:2017检测实验室通用要求
- AOCSCc7d-07脂质介质LC-MS定量
- CLSIEP17-A2低浓度检测验证
- GB/T22220-2008食品中前列腺素测定
- GB/T21981-2008动物源产品激素检测
- YY/T1740-2020液相色谱-质谱联用通则
检测设备
1.三重四极杆质谱:SCIEX6500+(质量精度<3ppm,MRM通道≥200)
2.超高效液相色谱:WatersACQUITYUPLCH-Class(压力上限15000psi)
3.固相萃取系统:GilsonGX-274(真空度<-90kPa)
4.冷冻离心机:Eppendorf5920R(温控范围-20℃~40℃)
5.氮吹浓缩仪:OrganomationN-EVAP112(控温精度±0.5℃)
6.电子分析天平:MettlerToledoXPR205(d=0.01mg)
7.超低温冰箱:ThermoForma900系列(-86℃±2℃)
8.酶标分析仪:BioTekSynergyH1(检测波长190-999nm)
9.pH精密计:Metrohm780(分辨率0.001pH)
10.真空离心浓缩仪:LabconcoCentriVap(真空度<5mTorr)
11.超声波破碎仪:SONICSVCX800(振幅1-100%)
12.纯水系统:MilliporeMilli-QIQ7000(电阻率18.2MΩ·cm)
13.生物安全柜:EscoAirstreamAC2-4S1(洁净度ISO5)
14.色谱柱温箱:Agilent1290TCC(控温±0.15℃)
15.自动进样器:CTCPALRTC(进样精度±0.5%)