分子标记物富集效率测定

检测项目

富集效率评估：

• 富集率：目标分子富集比例（%），特异性：非目标分子抑制率（≥95%，参照ISO20186）
• 回收率：富集后回收量占比（%）

• 杂质含量：残留污染物浓度（ppm）
• 浓度测定：富集后浓度（ng/μL），吸光度比值（A260/A280≥1.8）

• 交叉反应性：非目标结合率（≤5%）
• 靶向效率：特异性结合比例（参照GB/T37847）

• 回收量：富集后回收质量（μg），回收比例（≥90%）
• 损失率：处理过程中损失量（%）

• 储存稳定性：时间点降解率（≤10%/7天）
• 操作稳定性：重复使用效率（≥95%）

• 检测限：最低可测浓度（pg/μL）
• 定量限：可靠定量阈值（参照ISO20186）

• 批内变异：重复测试差异（CV≤5%）
• 批间变异：不同批次一致性（RSD≤10%）

• 污染率：样本间转移量（≤1%）
• 背景干扰：非特异性信号水平（AU）

• 线性范围：浓度-响应关系（R²≥0.99）
• 偏差值：实测与理论值差异（±5%）

• 结合效率：标记物-配体结合率（%）
• 活性保留：富集后功能性活性（≥85%）

检测范围

1.DNA样本：基因组DNA及片段富集，重点检测片段大小完整性和杂质残留

2.RNA样本：mRNA及总RNA富集，侧重降解率评估和完整性指数

3.蛋白质样本：抗体及酶标记物富集，核心检测结合特异性和活性保留

4.细胞样本：细胞裂解物表面标记物富集，聚焦回收率和交叉污染控制

5.血浆样本：循环肿瘤DNA及cfRNA富集，重点检测低浓度灵敏度和背景干扰

6.组织样本：FFPE及冷冻组织核酸富集，核心评估提取效率和纯度

7.微生物样本：病原体DNA及RNA富集，侧重特异性靶向和污染率

8.合成寡核苷酸：人工序列富集，重点检测定量准确性和稳定性

9.外泌体样本：外泌体RNA及蛋白富集，聚焦回收比例和功能性验证

10.芯片捕获样本：微阵列基础富集，核心评估富集率和重复性

检测方法

国际标准：

• ISO20186-2:2019分子诊断学-核酸分离纯化方法（要求特定缓冲液体系）
• ASTME2186-02a生物分子富集效率测定标准（采用荧光定量分析）

• GB/T37847-2019分子生物学检测方法通则（指定温度范围20-25°C）
• GB/T34797-2017蛋白质纯化效率测定方法（使用紫外分光光度法）

检测设备

1.离心机：EppendorfCentrifuge5430R（最大转速15,000rpm，温度控制±0.5°C）

2.PCR仪：ThermoFisherQuantStudio5（温度精度±0.1°C，96孔板容量）

3.分光光度计：NanoDropOne（检测范围0.2-15,000ng/μL，波长精度±1nm）

4.流式细胞仪：BDFACSAriaIII（检测限10^3颗粒/μL，激光波长488nm）

5.微阵列扫描仪：AgilentG2565CA（分辨率5μm，动态范围10^4）

6.电泳系统：Bio-RadPowerPac（电压范围50-300V，凝胶尺寸10cm）

7.质谱仪：WatersXevoTQ-S（质量精度±0.1Da，扫描速度10Hz）

8.色谱仪：ShimadzuProminence（流速范围0.001-10mL/min，压力精度±0.1MPa）

9.显微镜：OlympusBX53（放大倍数40-1000X，分辨率0.2μm）

10.恒温箱：MemmertIN110（温度范围-10-100°C，稳定性±0.1°C）

11.振荡器：IKAHS501（转速50-1500rpm，振幅5mm）

12.自动提取仪：QIAGENQiacube（通量1-12样本，提取时间≤30min）

13.实时荧光定量PCR仪：RocheLightCycler480（循环数40，荧光通道6）

14.纳米粒子分析仪：MalvernZetasizer（粒径范围0.3nm-10μm，精度±2%）

15.生物分析仪：AgilentBioanalyzer（样本量1-12μL，检测限0.1ng/μL）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"分子标记物富集效率测定"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。