检测项目
1. 生化特性鉴定:氧化酶试验、过氧化氢酶试验、尿素酶活性测定(25℃/37℃差异试验)
2. 血清分型检测:O抗原特异性凝集试验(涵盖18种血清型)
3. 毒力基因筛查:ail/virF/yadA/ystA/ystB基因PCR扩增(引物浓度0.2μM)
4. 抗生素敏感性试验:氨苄西林MIC值测定(CLSI M45-A3标准)
5. 分子分型分析:脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型(XbaI酶切条件37℃/4h)
检测范围
1. 食品样本:生鲜肉类制品(猪肉/牛肉/禽类)、巴氏杀菌乳制品
2. 临床样本:患者血液培养物、肠道活检组织及粪便标本
3. 环境样本:冷链运输水样、食品加工台面拭子
4. 动物源性产品:宠物饲料原料、畜牧养殖土壤样本
5. 特殊基质:真空包装食品内部气体成分分析
检测方法
ISO 10273:2017《食品链微生物学-小肠结肠炎耶尔森菌检测》(冷增菌法+CIN琼脂培养)
GB/T 4789.8-2016《食品安全国家标准 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验》(磷酸盐缓冲液预处理)
ASTM F3170-21《PCR快速筛查食品中致病性耶尔森菌标准指南》(TaqMan探针法)
WS/T 235-2016《小肠结肠炎耶尔森氏菌感染的诊断》(双相血培养瓶法)
SN/T 1870-2016《国境口岸致病性耶尔森菌实时荧光PCR检测规程》(探针浓度200nM)
检测设备
Thermo Fisher GeneAmp PCR System 9700:常规毒力基因扩增(温度精度±0.3℃)
Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System:多重荧光定量检测(FAM/HEX双通道)
bioMérieux VITEK 2 Compact:自动化生化鉴定卡(GN卡数据库V9.02版)
Bio-Rad CHEF Mapper XA系统:脉冲场电泳分型(电压梯度6V/cm)
Siemens MicroScan WalkAway Plus:抗生素药敏板条孵育读数(96孔板设计)
Eppendorf Centrifuge 5430 R:低温离心样本处理(最大转速30,000×g)
Thermo Scientific Heracell 150i CO2培养箱:选择性培养基培养(温度波动±0.5℃)
Olympus BX53荧光显微镜:免疫荧光染色观察(100×油镜数值孔径1.4)