检测项目
1.形态特征鉴定:成虫体长1.8-2.2mm,前翅网状斑纹密度≥15个/mm;若虫体表刺突长度0.05-0.08mm。
2.基因序列分析:COI基因片段扩增(658bp),ITS1区域比对相似度≥99%。
3.寄主选择性测试:茶树叶片受害面积占比>30%时判定为阳性。
4.抗药性监测:LC50值测定(吡虫啉≤5mg/L为敏感品系)。
5.卵孵化率测定:25℃恒温条件下孵化率≥85%为正常发育。
检测范围
1.茶树鲜叶及干制茶叶样本(含水率≤7%)
2.茶园土壤及周边植被(半径50m内)
3.进出口植物检疫中的寄主材料(含枝条、苗木)
4.仓储运输包装材料(木质/纸质容器表面残留物)
5.农药残留超标样本(有机磷类、拟除虫菊酯类)
检测方法
1.GB/T31748-2015《植物检疫昆虫标本制作与鉴定技术规范》
2.ISO21571:2005《分子生物学检测DNA提取与扩增通用方法》
3.ASTME2455-06《昆虫抗药性生物测定标准指南》
4.GB/T28068-2011《危险性有害生物寄主范围测定准则》
5.SN/T4333-2015《进出境植物检疫昆虫饲养技术规范》
检测设备
1.OlympusBX53生物显微镜(1000倍显微成像)
2.Bio-RadT100PCR仪(温控精度0.3℃)
3.Agilent4200TapeStation系统(DNA/RNA完整性分析)
4.Eppendorf5424R高速离心机(最大转速15,000rpm)
5.ThermoScientificMultiskanSky全波长酶标仪(吸光度范围0-4OD)
6.LeicaCM1950冷冻切片机(切片厚度1-100μm可调)
7.ShimadzuGCMS-QP2020NX气相色谱质谱联用仪(检出限0.1ppb)
8.MemmertIPP110培养箱(温控范围0-70℃0.1℃)
9.SartoriusQuintix224-1CN电子天平(精度0.1mg)
10.ZeissStemi508体视显微镜(8:1变倍比)