检测项目
1.分子量分布测定:采用MALDI-TOFMS测定酶解片段分子量(范围500-5000Da),误差≤0.05%
2.氨基酸组成分析:通过HPLC-UV测定20种氨基酸含量(检出限0.1nmol)
3.二硫键定位验证:使用LC-MS/MS结合还原/非还原对比法(分辨率≥70,000)
4.N/C端序列分析:Edman降解法定量测定前5位氨基酸序列(准确率≥99.9%)
5.糖基化位点鉴定:HILIC-UPLC结合Q-ExactiveHF-X质谱(质量精度<3ppm)
检测范围
1.生物制药:单克隆抗体(IgG1/IgG4)、重组蛋白(EPO、胰岛素类似物)
2.诊断试剂:化学发光免疫分析用抗原/抗体偶联物
3.食品工业:乳清蛋白水解物、大豆肽功能性食品原料
4.科研材料:固相合成多肽(纯度≥95%,长度≤50AA)
5.医疗器械:胶原蛋白植入材料(I/III型)降解产物分析
检测方法
1.ISO21348-2005《蛋白质测序质谱分析方法》
2.ASTME2406-21《高效液相色谱法测定氨基酸组成标准规程》
3.GB/T38165-2019《人用重组DNA制品肽图分析通则》
4.USP<1052>生物技术衍生产品特性分析方法
5.EP2.2.56《肽图谱法测定重组DNA表达产品质量》
检测设备
1.ThermoScientificOrbitrapFusionLumos:三合一高分辨质谱仪(分辨率450,000@m/z200)
2.Agilent1260InfinityIIHPLC:配备DAD检测器(波长范围190-950nm)
3.WatersXevoG2-XSQTOF:四极杆飞行时间质谱(质量精度<1ppm)
4.ShimadzuNexeraUHPLC:超高效液相色谱系统(耐压130MPa)
5.BrukerultrafleXtremeMALDI-TOF/TOF:基质辅助激光解吸电离源(激光频率2000Hz)
6.AppliedBiosystemsProcise494HT:全自动Edman降解测序仪(灵敏度达1pmol)
7.DionexICS-6000:离子色谱系统(电导检测器精度0.1nS/cm)
8.EppendorfMastercyclerX50s:PCR仪(温控精度0.1℃)用于酶解前处理