检测项目
1.形态特征鉴定:体长测量(3.2-4.1mm)、前翅横脉数量(≥5条)、后足胫节刺列排布
2.DNA条形码分析:COI基因序列(658bp)、ITS2区段(450-500bp)扩增与比对
3.显微结构观测:头冠部刻点密度(20-25个/0.1mm)、阳茎端突弯曲角度(110-125)
4.寄主植物关联性:刺吸式口器残留物PCR检测(18SrDNA)
5.种群遗传分析:微卫星位点分型(SSR-15/SSR-22等8个多态位点)
检测范围
1.田间采集的疑似成虫标本(乙醇固定样本)
2.植物检疫截获的卵/若虫阶段生物样本
3.博物馆馆藏历史标本(针插干燥标本)
4.寄主植物叶片残留分泌物(蜜露结晶物)
5.土壤基质中的越冬蛹壳样本
检测方法
1.GB/T31745-2015《农业植物检疫鉴定规程》形态学鉴定标准
2.ISO/IEC17025:2017分子生物学实验室质控规范
3.ASTME2458-10(2020)昆虫标本DNA提取标准流程
4.GB/T35342-2017实蝇科昆虫分子鉴定方法(COI基因适用)
5.IPPCISPM27《限定性有害生物诊断协议》检疫程序
检测设备
1.OlympusBX53研究级生物显微镜(1000油镜观察翅脉结构)
2.LeicaM205C体视显微镜(三维成像测量体长数据)
3.Bio-RadT100ThermalCyclerPCR仪(基因片段扩增)
4.IlluminaMiSeq测序平台(高通量SSR分型分析)
5.ZEISSEVOMA15扫描电镜(表皮微结构观测)
6.ThermoNanoDropOne紫外分光光度计(DNA纯度检测)
7.Agilent4200TapeStation系统(DNA完整性评估)
8.KeyenceVHX-7000数码显微系统(三维形态建模)
9.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机(核酸提取)
10.BinderCB系列恒温培养箱(281℃样本预处理)