检测项目
1.形态学鉴定:体长3.5-4.5mm,翅脉Sc脉末端超过R4+5分叉点,腹部背板具浅色基带
2.基因序列分析:线粒体COI基因(658bp)、核糖体ITS2区段(300-450bp)特异性扩增与测序
3.抗药性测试:拟除虫菊酯类(氯菊酯0.25%)、有机磷类(马拉硫磷5%)击倒率与致死率测定
4.病原体携带检测:西尼罗病毒(qPCRCt值≤38)、乙型脑炎病毒(RT-LOD10^2copies/μL)
5.环境适应性评估:幼虫发育阈值温度(10-35℃)、盐度耐受范围(0-15‰)
检测范围
1.成蚊样本:野外采集的吸血雌蚊标本(75%乙醇固定)
2.幼虫样本:孳生地采集的4龄幼虫(生理盐水暂存)
3.卵样本:人工饲养产卵筏上的卵块(湿度>80%保存)
4.环境样本:孳生水体pH值(6.5-8.0)、溶解氧(>3mg/L)监测
5.宿主血液样本:鸟类/哺乳动物宿主的血粉残留DNA分析
检测方法
1.形态鉴定:GB/T23797-2009《蚊虫分类与鉴定技术规范》第四部分
2.分子鉴定:ISO/IEC17025:2017《基因条形码测序质控标准》
3.抗药性检测:WHO/HTM/NTD/VEM/2021.07《蚊虫抗药性生物测定指南》
4.病毒分离:ASTME2276-18《虫媒病毒细胞培养分离标准规程》
5.水质分析:GB/T5750-2006《生活饮用水标准检验方法》第3.1条
检测设备
1.OlympusBX53显微镜:配备DP27摄像系统,400下观察翅脉特征
2.Bio-RadT100ThermalCycler:执行COI基因PCR扩增程序(95℃预变性5min)
3.IlluminaMiSeq测序仪:完成双端300bp高通量测序(Q30≥80%)
4.WHO试管法测试装置:包含标准药剂浸渍纸(1215cm规格)
5.HACHHQ40d多参数水质仪:测量水体电导率(0-200mS/cm)和溶解氧
6.ThermoScientificHeracell150i培养箱:维持病毒分离所需37℃1℃恒温条件
7.SartoriusCPA225D电子天平:精确称量幼虫体重(0.01mg分辨率)
8.LeicaCM1950冷冻切片机:制作蚊虫组织病理学标本(-20℃切片)
9.PerkinElmerEnVision酶标仪:读取ELISA板OD450nm吸光值
10.ESCOAC2-4S1生物安全柜:提供病原体操作所需的二级生物防护