检测项目
1.虫口密度测定:单位面积(cm)叶片正反面蚜虫数量统计(0-500头/cm)
2.若虫/成虫比例分析:发育阶段分类计数(体长0.8-2.3mm分级)
3.病毒携带率筛查:RT-PCR检测小RNA病毒(检出限10拷贝/μL)
4.抗药性基因检测:kdr突变位点L1014F的qPCR定量(灵敏度0.1%)
5.蜜露分泌量测定:比色法测定葡萄糖当量(0-50μg/cmh)
检测范围
1.鲜叶样本:成熟叶片(叶龄30-45天)与嫩叶(叶龄7-15天)
2.枝条样本:直径3-5mm新生枝条表皮组织
3.土壤残留物:根际周围0-20cm土层中越冬卵密度
4.包装材料:运输用PE膜表面附着虫体筛查
5.周边寄主植物:蔷薇科近缘种(悬钩子属、苹果属)交叉感染监测
检测方法
GB/T31745-2015《植物检疫处理基本要求》田间采样规范
ISO21571:2005分子生物学检测核酸提取标准流程
ASTME1752-17显微成像系统虫体形态测量方法
GB23200.121-2021农药残留液相色谱-串联质谱法
NY/T3088-2017蚜虫抗药性监测技术规程
检测设备
OlympusBX53研究级显微镜:配备DP27相机(分辨率20481536)进行形态学观察
ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪:支持TaqMan探针法基因分型
Agilent1260InfinityIIHPLC系统:配备DAD检测器(波长范围190-950nm)分析蜜露成分
SartoriusCP225D电子天平:称量精度0.01mg用于生物量测定
LeicaCM1950冷冻切片机:-30℃低温切片保持样本完整性
Bio-RadChemiDocMP成像系统:化学发光检测病毒蛋白表达量
Eppendorf5920R高速冷冻离心机:最大转速20,000rpm用于核酸分离
MemmertIPP110培养箱:温度控制精度0.1℃用于活体培养观察
PerkinElmerLambda365紫外分光光度计:波长扫描范围190-1100nm测定样本纯度