检测项目

1.病原菌形态学鉴定：孢子囊直径（14-20μm）、卵孢子壁厚（1.5-3μm）、孢囊梗长度（25-50μm）

2.分子生物学检测：ITS序列比对（GenBank登录号KF766190）、β-tubulin基因扩增

3.生理生化特性分析：最适生长温度（18-22℃）、pH耐受范围（5.5-7.0）、孢子萌发率（≥85%）

4.寄主特异性测试：对甘蓝/花椰菜/芥菜的侵染能力分级（0-4级）

5.抗药性监测：甲霜灵EC50值测定（0.05-1.2μg/mL）、嘧菌酯敏感性测试

检测范围

1.甘蓝幼苗期至成熟期全株样本

2.十字花科种子检疫（含水量≤8%）

3.田间病叶样本（病斑直径≥2mm）

4.土壤残留菌源检测（孢子密度≥10/g）

5.农用器械表面微生物污染筛查

检测方法

1.ISO21458:2009《植物病原卵菌分子检测技术规范》

2.GB/T3543.5-1995《农作物种子检验规程真实性和品种纯度鉴定》

3.ASTMD8083-16《植物病原菌实时荧光定量PCR标准方法》

4.NY/T401-2000《蔬菜种子产地检疫规程》

5.GB/T36837-2018《植物病原卵菌分离培养技术规范》

检测设备

1.OlympusBX53显微镜：配备DP27成像系统（1000油镜观察孢子结构）

2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪：TaqMan探针法基因扩增

3.EppendorfCentrifuge5430R高速冷冻离心机：最大转速30,000rpm（核酸提取）

4.MemmertIPP110培养箱：温度控制精度0.1℃（病原菌培养）

5.IlluminaMiSeq测序平台：PE300双端测序（全基因组分析）

6.SartoriusCP225D电子天平：0.01mg精度（药剂称量）

7.LeicaCM1950冷冻切片机：-30℃低温切片（组织病理学观察）

8.BioTekSynergyH1酶标仪：OD600吸光度测定（菌丝生物量分析）

9.ZeissAxioZoom.V16体视显微镜：50放大倍率（病斑形态观察）

10.MettlerToledoSevenExcellencepH计：0.001精度（培养基配制）