检测项目

1.病毒核酸检测（RT-PCR）：靶标基因为SH基因和HN基因，灵敏度≥95%，特异性≥98%

2.IgM抗体检测（ELISA法）：捕获法检测血清/泪液IgM抗体，临界值OD450≥0.8

3.IgG抗体亲和力指数：采用抗原竞争ELISA法测定亲和力指数≥60%

4.病毒分离培养：Vero细胞系培养观察CPE效应，阳性判定周期5-7天

5.眼结膜刮片免疫荧光：FITC标记单克隆抗体检测抗原阳性率≥85%

检测范围

1.临床样本：急性期患者咽拭子、泪液样本及结膜刮片

2.血清标本：双份血清（急性期与恢复期）

3.病毒培养物：Vero细胞系传代毒株

4.分子生物学试剂：核酸提取试剂盒（磁珠法）

5.免疫诊断材料：重组NP蛋白抗原（纯度≥90%）

检测方法

1.ISO15189:2012《医学实验室质量和能力要求》

2.GB/T37837-2019《核酸扩增法检测病毒通用要求》

3.WS295-2016《流行性腮腺炎诊断标准》

4.ASTME3066-16《实时荧光PCR方法验证指南》

5.YY/T1183-2010《酶联免疫吸附法试剂盒》

检测设备

1.实时荧光定量PCR仪（RocheLightCycler480II）：多重靶标扩增与熔解曲线分析

2.全自动酶免分析仪（TecanFreedomEVOlyzer）：高通量IgM/IgG抗体定量

3.生物安全柜（ESCOAirstreamACB-4E）：BSL-2级病毒样本处理

4.倒置荧光显微镜（OlympusIX73）：细胞病变效应观察与免疫荧光判读

5.高速冷冻离心机（Eppendorf5424R）：最大转速15,000rpm样本预处理

6.核酸提取仪（QiagenQIAcubeHT）：磁珠法自动提取病毒RNA

7.CO₂培养箱（ThermoScientificHeracellVIOS）：Vero细胞培养环境控制

8.多功能酶标仪（BioTekSynergyH1）：ELISA结果OD值读取与分析

9.超低温冰箱（HaierDW-86L728）：-80℃病毒样本长期保存

10.电泳成像系统（Bio-RadGelDocXR+）：PCR产物电泳验证分析