检测项目
1.生物活性测定:采用细胞增殖法(TF-1细胞系)测定效价(IU/mg),误差范围≤15%
2.纯度分析:SEC-HPLC法测定单体含量(≥98.0%),RP-HPLC法检测氧化修饰体(≤3.0%)
3.分子量测定:MALDI-TOF质谱法确认分子量(18,000-21,000Da),偏差≤0.1%
4.等电点分析:毛细管等电聚焦法(cIEF)测定pI值(3.8-4.5),分辨率0.05pH
5.残留宿主蛋白:ELISA法检测CHO蛋白残留(≤100ppm),灵敏度0.1ng/mL
检测范围
1.重组人促红素注射液:成品制剂的质量放行检验
2.原料药中间体:发酵液纯化过程中的过程控制
3.生物类似药:一致性评价中的可比性研究
4.细胞培养上清液:生产工艺开发阶段的表达量监测
5.临床研究样本:药代动力学试验中的浓度测定
检测方法
1.生物活性:USP<111>细胞增殖法/EP2.7.25/ChP2020通则1212
2.纯度分析:ISO13022:2012生物制品表征指南/GB/T34818-2017
3.糖基化分析:ASTME3066-16糖谱测定标准方法/YY/T1611-2018
4.残留DNA检测:WHOTRS978Annex3/QB/T5298-2018荧光探针法
5.无菌检查:ISO11737-1:2018微生物控制/GB/T14233.2-2005
检测设备
1.Agilent1260InfinityIIHPLC:配备BioSEC-5色谱柱(4.6300mm),用于分子排阻色谱分析
2.WatersXevoG2-XSQTOF质谱仪:高分辨质谱测定分子量及肽图指纹
3.BeckmanPA800Plus毛细管电泳仪:cIEF模式等电点精确测定
4.PerkinElmerEnVision多模式读板机:ELISA法宿主蛋白残留检测
5.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪:细胞活性MTT法吸光度测定
6.SartoriusCedexBioHT细胞分析仪:TF-1细胞培养过程实时监测
7.MalvernZetasizerNanoZSP:动态光散射法测定蛋白聚集状态
8.EppendorfBioPhotometerD30:核酸残留A260/A280比值快速测定
9.MettlerToledoSevenExcellencepH计:缓冲体系pH值精密校准(0.001)
10.MemmertCO₂培养箱:维持37℃/5%CO₂细胞培养环境