检测项目

1.毒力基因簇分析：VFs（VirulenceFactors）、PAIs（PathogenicityIslands）全基因组扫描

2.毒素蛋白表达量测定：ELISA定量分析肠毒素/溶血素/神经毒素等

3.生物膜形成能力测试：结晶紫染色法测定OD570值

4.抗生素敏感性试验：MIC值测定（CLSIM100标准）

5.宿主细胞侵袭实验：HeLa/Macrophage细胞系侵袭率统计

检测范围

1.临床分离菌株：金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等耐药菌株

2.疫苗生产用减毒株：脊髓灰质炎病毒疫苗株、卡介苗BCG等

3.食品污染微生物：单增李斯特菌、沙门氏菌等食源性致病菌

4.农业病原体：稻瘟病菌、柑橘黄龙病病原体等植物致病微生物

5.环境微生物样本：水体/土壤中军团菌、铜绿假单胞菌等

检测方法

1.全基因组测序：ISO/IEC17025:2017标准下的IlluminaNovaSeq6000平台

2.实时荧光定量PCR：GB/T27403-2008规范执行毒力基因qPCR验证

3.蛋白质印迹分析：参照GB/T34797-2017进行毒力蛋白WesternBlot检测

4.动物模型验证：ASTMF2459-05(2020)标准小鼠感染模型建立

5.生物信息学分析：采用VFDB数据库（http://www.mgc.ac.cn/VFs/）进行毒力基因注释

检测设备

1.实时荧光定量PCR仪：ABIQuantStudio7Pro（动态范围1-10^10拷贝）

2.全自动微生物鉴定系统：VITEK2Compact（可鉴定500+菌种）

3.超高效液相色谱仪：WatersACQUITYUPLCH-Class（毒素分离精度0.1ng/mL）

4.激光共聚焦显微镜：LeicaTCSSP8（生物膜三维重构分析）

5.高通量测序平台：IlluminaNovaSeq6000（PE150测序模式）

6.流式细胞仪：BDFACSCelesta（宿主细胞感染率多参数分析）

7.全自动酶标仪：TecanInfiniteM200Pro（OD值测量精度0.001）

8.生物安全柜：ESCOAirstreamClassIIB2（HEPAH14级过滤）