检测项目
1.血浆Lyso-SM浓度测定：采用LC-MS/MS法检测Lyso-SM（d18:1）浓度范围0.5-50ng/mL
2.白细胞酸性神经酰胺酶活性分析：比色法测定酶活性单位（nmol/h/mg蛋白），参考区间≥15nmol/h/mg
3.尿鞘脂代谢物筛查：UHPLC-QTOF法检测C18-C26链长神经酰胺及衍生物
4.ASAH1基因全外显子测序：覆盖9个外显子及剪切区域，变异检出限≤1%
5.皮肤成纤维细胞培养分析：体外培养检测神经酰胺累积量（μg/mg蛋白）
检测范围
1.全血样本（EDTA抗凝）：用于白细胞分离及DNA提取
2.皮肤活检组织：成纤维细胞原代培养物
3.脑脊液标本：Lyso-SM中枢神经系统分布评估
4.干血片样本：新生儿筛查适用（直径≥6mm血斑）
5.石蜡包埋组织：回顾性病理学分析
检测方法
1.ISO15197:2013《体外诊断系统-质控要求》
2.CLSIEP17-A2《低浓度生物标志物检测协议》
3.GB/T37868-2019《生物样本库质量和能力通用要求》
4.ACMGAMP2015《基因变异解读指南》
5.ASTME3066-16《代谢组学数据标准化指南》
检测设备
1.ThermoFisherTSQAltis三重四极杆质谱仪：Lyso-SM定量分析（MRM模式）
2.IlluminaNovaSeq6000测序系统：ASAH1基因高通量测序
3.WatersACQUITYUPLCH-Class系统：鞘脂类代谢物分离
4.BeckmanCoulterAU5800生化分析仪：酶活性比色测定
5.LeicaCM1950冰冻切片机：组织样本制备（-20℃温控）
6.EppendorfCellCultureCO2培养箱：成纤维细胞培养（5%CO2,37℃）
7.Agilent2100Bioanalyzer：DNA/RNA完整性检测（DV200≥30%）
8.RocheLightCycler480II：qPCR验证点突变（SYBRGreen法）
9.PerkinElmerJANUSG3工作站：自动化液体处理（精度1μL）