检测项目
1.形态学鉴定:体长1.8-2.3mm;前翅端室3个;头冠部具2对黑斑;后足胫节刺列式2+6+4
2.DNA条形码分析:COI基因658bp序列比对;ITS2区域特异性引物Hphy-F/R扩增
3.寄主适配性测试:刺吸电位图谱(EPG)监测;取食位点X波持续时间≥300s/24h
4.病原体筛查:植原体16SrV组特异性引物R16mF2/R1扩增;巢式PCR检出限≤10copies/μL
5.抗药性监测:LC50值测定(吡虫啉≥50mg/L判定为抗性种群);乙酰胆碱酯酶活性抑制率≤30%
检测范围
1.鲜食葡萄及酿酒葡萄植株(Vitisvinifera)
2.柑橘类苗木接穗(Citrusspp.)
3.进出口木质包装材料(ISPM15标准)
4.枣树栽培基质(Ziziphusjujuba)
5.组培植物种质资源(离体培养物)
检测方法
ASTME1752-08昆虫标本DNA提取规范
ISO21571:2013分子生物学检测通用技术要求
GB/T28068-2018检疫性叶蝉科害虫鉴定规程
SN/T5146-2019植原体实时荧光PCR检测方法
NY/T3967-2021农药抗性监测技术准则
检测设备
LeicaM205C体视显微镜:60放大倍率,DFC450数码成像系统
ThermoFisherQuantStudio5qPCR仪:96孔板设计,TaqMan探针检测模式
Agilent4200TapeStation系统:DNA完整性评估(DIN值≥7.0)
EPGGiga-8系统:昆虫刺吸行为监测(100mV信号采样率)
HitachiSU3500扫描电镜:15kV加速电压,二次电子成像模式
WatersACQUITYUPLCH-Class:新烟碱类农药残留分析(检出限0.01mg/kg)
BeckmanCoulterDTX880多模式读板机:酶活性比色法测定(405nm波长)
IlluminaMiSeq测序平台:COI基因双端300bp测序深度
OlympusBX53荧光显微镜:DAPI/FITC双通道滤光系统
SartoriusCP225D电子天平:0.01mg精度称量(样本制备用)