检测项目
1.核小体定位精度检测:分辨率≤10bp,覆盖度≥95%
2.组蛋白H3K4me3修饰定量:灵敏度0.1ng/μL,线性范围0.5-50ng
3.微球菌核酸酶(MNase)消化效率:消化时间梯度0-60min,片段大小150-900bp
4.核小体重复长度测定:测量误差2bp,适用DNA长度1475bp
5.组蛋白变体H2A.Z含量分析:检测限0.05%,相对标准偏差≤5%
6.DNA可及性指数(ATAC-seq):测序深度≥20Mreads/sample
检测范围
1.哺乳动物细胞系(HEK293、HeLa等)染色质样本
2.临床组织样本(冷冻/石蜡包埋)染色质提取物
3.模式生物(果蝇、线虫)胚胎发育阶段染色质
4.植物(拟南芥、水稻)表观遗传突变体材料
5.抗肿瘤药物处理后的染色质可及性变化样本
6.体外重组核小体复合物模型系统
检测方法
1.MNase-seq:ISO21748:2017核酸酶消化标准化流程
2.ChIP-seq定量:GB/T37872-2019染色质免疫沉淀技术规范
3.ATAC-seq分析:ENCODEConsortium标准v3.0
4.CUT&Tag技术:NatureProtocols16(6):2749-2781
5.单细胞核小体定位:10xGenomicsChromiumSingleCellATAC方案
6.化学交联效率测定:ASTME3066-2018交联剂残留量测试标准
检测设备
1.CovarisS220超声破碎仪:DNA片段化(100-500bp),CV≤5%
2.Agilent2100Bioanalyzer:DNA完整性检测(DV200≥80%)
3.ThermoFisherQubit4.0:微量DNA定量(0.1-60ng/μL)
4.IlluminaNovaSeq6000:高通量测序(PE150模式)
5.Bio-RadCFX96Touch:qPCR定量(SYBRGreen法)
6.NanodropOneC:核酸纯度检测(A260/A280≥1.8)
7.EppendorfCentrifuge5430R:低温离心(4℃,15000g)
8.DiagenodeBioruptorPico:染色质片段化(200-1000bp)
9.PerkinElmerLabChipGXTouch:蛋白质-DNA复合物分析
10.BeckmanCoulterCytoFLEXS:流式细胞分选(FACS)