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双底物动力学检测

  • 原创官网
  • 2025-05-17 00:22:49
  • 关键字:双底物动力学测试范围,双底物动力学测试标准,双底物动力学测试方法
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双底物动力学检测概述:检测项目1.双底物米氏常数(Km₁/Km₂):测定酶对两种底物的表观亲和力(单位:mmol/L)2.最大反应速率(Vmax):表征酶促反应极限速度(单位:μmol/minmg)3.催化效率比值(kcat/Km):计算两种底物的催化特异性差异(单位:L/(mols))4.抑制常数(Ki):评估竞争性/非竞争性抑制剂的影响(单位:μmol/L)5.pH/温度依赖性:测定反应体系在pH4.0-9.0、温度25-45℃下的活性变化检测范围1.氧化还原酶类:NAD(P)H依赖型脱氢酶、细胞色素P450单加氧酶2.转


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检测项目

1.双底物米氏常数(Km₁/Km₂):测定酶对两种底物的表观亲和力(单位:mmol/L)

2.最大反应速率(Vmax):表征酶促反应极限速度(单位:μmol/minmg)

3.催化效率比值(kcat/Km):计算两种底物的催化特异性差异(单位:L/(mols))

4.抑制常数(Ki):评估竞争性/非竞争性抑制剂的影响(单位:μmol/L)

5.pH/温度依赖性:测定反应体系在pH4.0-9.0、温度25-45℃下的活性变化

检测范围

1.氧化还原酶类:NAD(P)H依赖型脱氢酶、细胞色素P450单加氧酶

2.转移酶类:激酶(如己糖激酶)、转氨酶(如谷丙转氨酶)

3.水解酶类:脂肪酶(CALB型)、β-内酰胺酶

4.裂解酶类:碳酸酐酶、醛缩酶

5.合成酶类:ATP依赖型氨基酸连接酶

检测方法

1.ISO10993-15:2019生物材料体外降解动力学测试方法

2.ASTME2935-17连续分光光度法测定酶动力学参数标准指南

3.GB/T34800-2017蛋白酶活力测定分光光度法

4.GB/T41959-2022脂肪酶催化活力检测方法

5.ISO20633-2015体外诊断试剂盒中酶活性测量程序

检测设备

1.ThermoScientificMultiskanSkyHigh全波长酶标仪:支持340-900nm连续波长扫描,数据采集频率达10Hz

2.AgilentCaryEclipse荧光分光光度计:配备温控样品池(0.1℃精度),时间分辨荧光检测模式

3.MalvernPanalyticalMicroCalPEAQ-ITC等温滴定量热仪:直接测量反应焓变(灵敏度0.1μcal/s)

4.BeckmanCoulterProteomeLabXL-I分析型超速离心机:沉降速度法测定大分子相互作用系数

5.WatersACQUITYUPLCH-Class超高效液相色谱:配合PDA检测器实现产物定量分析(保留时间RSD≤0.05%)

6.Metrohm848TitrinoPlus自动电位滴定仪:精确控制底物浓度梯度(加液精度0.1μL)

7.AntonPaarLitesizer500纳米粒度仪:动态光散射法监测酶-底物复合物粒径变化

8.ShimadzuLCMS-8060三重四极杆质谱联用系统:同位素标记底物的代谢产物鉴定

9.PerkinElmerLambda365紫外可见分光光度计:双光束设计实现基线漂移补偿(波长精度0.1nm)

10.MetrohmAutolabPGSTAT204电化学工作站:循环伏安法研究氧化还原酶的电子传递机制

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报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

  以上是与双底物动力学检测相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

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