检测项目
1.虫体形态学鉴定:测量雌成虫体长(1.8-3.2mm)、蜡壳直径(4.5-6.0mm)、气门刺数量(5-7根)等形态参数
2.分子生物学检测:基于线粒体COI基因序列比对(相似度≥98%),引物设计C1-J-1751:5'-GGATCACCTGATATAGCATTCCC-3'
3.卵密度测定:采用显微计数法统计单位叶面积卵量(粒/cm),分辨率0.1粒/cm
4.若虫存活率检测:通过人工气候箱模拟251℃/RH70%环境进行发育观察
5.蜡质层成分分析:使用GC-MS测定三十烷醇含量(≥85%),检出限0.01μg/g
检测范围
1.柑橘属植物:包括脐橙(Citrussinensis)、柚子(Citrusmaxima)等栽培品种新鲜叶片及果实
2.观赏植物:山茶科(Theaceae)、木兰科(Magnoliaceae)等园林绿化树种
3.进出口苗木:直径≥2cm的嫁接苗接口部位及根系土球
4.土壤样本:深度0-30cm耕作层中越冬若虫检测
5.包装材料:木质托盘及纸质包装物表面残留虫体筛查
检测方法
1.ISO23537:2017《植物检疫介壳虫科鉴定技术规范》形态学鉴定流程
2.GB/T28158-2011《柑橘类害虫分子检测通则》DNA条形码技术应用
3.ASTME1752-17《植物病虫害显微测量标准指南》虫体尺寸测量规范
4.SN/T4338-2015《进境植物检疫中蜡蚧科检疫鉴定方法》口岸检疫标准
5.NY/T3088-2017《柑橘绵蜡蚧监测技术规程》田间调查方法
检测设备
1.奥林巴斯SZ61体视显微镜:20-40倍连续变倍系统,配备DP27数码成像模块
2.Bio-RadT100PCR仪:支持梯度PCR程序,温控精度0.1℃
3.ThermoScientificISQLT单四极杆GC-MS:质量范围10-1050amu,扫描速率12500amu/s
4.Eppendorf5424R高速离心机:最大转速14600rpm,温度控制范围-9℃至40℃
5.LeicaCM1950冰冻切片机:切片厚度1-100μm可调,标本台温度-50℃至0℃
6.MemmertIPP400培养箱:温度范围0-70℃,湿度控制精度1%RH
7.SartoriusQuintix224-1CN分析天平:称量精度0.1mg,最大载荷220g
8.ThermoNanoDropOne超微量分光光度计:检测波长范围190-850nm,样品量0.5-2μL
9.ZeissAxioImagerA2正置显微镜:配备DIC微分干涉组件,最大放大倍数1000
10.Agilent4200TapeStation系统:DNA/RNA完整性评估,样本通量16个/批次