检测项目
1.病原菌种类鉴定:通过ITS序列分析(GenBank登录号比对)确认Oidium属特异性基因片段
2.孢子浓度测定:采用血球计数板法(测量范围0-10^6spores/mL)
3.菌丝体分离培养:马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)培养(温度251℃,湿度85%)
4.叶片感染指数评估:按0-4级分级标准(病斑面积占比≤5%为1级)
5.杀菌剂敏感性测试:EC50值测定(苯醚甲环唑梯度浓度0.01-10mg/L)
检测范围
1.芒果叶片样本(成熟叶/嫩叶组织切片)
2.果实表面菌膜(果皮刮取物)
3.植株茎秆表皮附着物
4.果园土壤样本(0-20cm表层土)
5.农用器械表面残留物(剪刀/嫁接刀擦拭样本)
检测方法
ISO16050:2017《食品中真菌毒素测定通用规范》孢子计数法
GB/T28068-2011《植物病原真菌分离培养技术规程》
ASTME1758-01(2020)《植物病害严重度分级标准》
NY/T1859.2-2010《农作物病害鉴定规程第2部分:白粉病》
SN/T4283.1-2015《植物检疫处理基本要求》分子生物学检测法
检测设备
1.OlympusBX53荧光显微镜(1000油镜观察分生孢子梗形态)
2.Bio-RadT100PCR仪(扩增ITS1/ITS4引物序列)
3.ThermoScientificHeratherm培养箱(温控精度0.3℃)
4.SartoriusCP225D电子天平(称量精度0.01mg)
5.LeicaCM1950冷冻切片机(制备20μm组织切片)
6.Eppendorf5920R高速离心机(最大转速20,000g)
7.MemmertHPP750恒温恒湿箱(湿度控制范围30%-95%)
8.ShimadzuUV-2600i分光光度计(OD600菌液浓度测定)
9.MiltenyiBiotecGentleMACS组织研磨器(低温破碎样本)
10.ZeissAxioImager.A2微分干涉显微镜(观察菌丝附着胞结构)