检测项目
1.虫卵密度测定:每平方厘米球果表面0.5-2.0个卵粒
2.幼虫体长测量:1.2-3.8mm分段记录
3.蛹形态特征分析:复眼色素沉积度≥70%为成熟标志
4.成虫翅脉参数:R4+5脉分叉角度325
5.虫瘿直径分级:Ⅰ级≤3mm;Ⅱ级3-6mm;Ⅲ级≥6mm
检测范围
1.油松受害球果样本(PinustabuliformisCarr.)
2.虫瘿组织切片(横切厚度10μm)
3.幼虫期样本(L1-L4各龄期)
4.成虫标本(雌雄比1:1.3)
5.土壤残留物(深度0-20cm)
检测方法
1.GB/T23626-2009《松树害虫检疫鉴定方法》虫卵密度测定
2.LY/T2348-2014《林业有害生物监测技术规程》幼虫形态分析
3.ISO21571:2005分子生物学鉴定(COI基因序列比对)
4.ASTME1752-17虫瘿解剖显微观察标准
5.GB15569-2009农业植物检疫实验室技术要求
检测设备
1.OlympusBX53研究级显微镜(1000油镜观察卵壳纹饰)
2.LeicaM205C体视镜(三维成像测量蛹体结构)
3.ThermoNanoDrop2000c核酸定量仪(DNA纯度OD260/280≥1.8)
4.Bio-RadT100PCR仪(扩增条件:94℃预变性5min)
5.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机(12000rpm分离虫体蛋白)
6.SartoriusCP225D电子天平(精度0.01mg称量样本)
7.MemmertIPP110培养箱(251℃恒温饲养观察)
8.ZeissAxioImager.A2荧光显微镜(DAPI染色观察细胞结构)
9.Agilent7890B气相色谱仪(挥发性信息素成分分析)
10.ThermoScientificHeratherm烘箱(80℃烘干样本24h)