检测项目
1.形态学鉴定:翅脉R2+3脉长度(0.82-1.12mm)、后足跗节白环宽度(0.15-0.25mm)、腹节背板银白斑形态
2.COI基因序列分析:658bp条形码区域扩增及BLAST比对(相似度≥98%)
3.kdr抗性基因分型:L1014F/S/T突变位点PCR-RFLP检测(限制性内切酶HinfI)
4.代谢酶活性测定:细胞色素P450酶活性(7-乙氧基香豆素-O-脱乙基酶法)
5.杀虫剂敏感性测试:成蚊接触筒法测定氯菊酯LC50值(0.05-0.25%浓度梯度)
检测范围
1.野外采集成蚊标本(双翅目蚊科库蚊属)
2.实验室饲养F1代种群
3.虫卵及四龄幼虫样本
4.病媒监测诱捕器捕获混合样本
5.跨境运输货物携带可疑蚊类
检测方法
1.ISO23529:2016《病媒生物形态学鉴定规范》
2.GB/T23797-2009《蚊虫抗药性检测方法》
3.ASTME2884-18《昆虫DNA条形码分析标准指南》
4.WHO/CDS/CPE/PVC/2006《杀虫剂敏感性生物测定技术手册》
5.GB/T31717-2015《媒介生物标本分子生物学鉴定规范》
检测设备
1.NikonEclipseCi-L生物显微镜(物镜NA0.75,目镜10/22mm)
2.Bio-RadT100PCR仪(96孔梯度温控系统)
3.Agilent4200TapeStation核酸分析系统(DNA检测灵敏度1ng/μL)
4.ThermoScientificMultiskanFC酶标仪(波长范围340-850nm)
5.LeicaM205C体视显微镜(20:1变焦比)
6.SartoriusCP225D电子天平(精度0.01mg)
7.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机(最大转速30,000rpm)
8.MemmertICP800培养箱(温度波动度0.3℃)
9.HamiltonMicrolabSTARlet液体工作站(加样精度1%)
10.ShimadzuGCMS-QP2020NX气质联用仪(EI源70eV)