检测项目
1.形态学鉴定:体长1.2-2.3mm;触角6节长度比1:1:1:0.8:0.7:0.5;腹管长度0.12-0.18mm
2.分子生物学检测:线粒体COI基因658bp序列比对(GenBank登录号KY464275-KY464281)
3.寄主植物关联性:蔷薇科植物叶片背面虫瘿直径≥3mm
4.生物量测定:单头蚜虫DNA提取量≥15ng/μL(Qubit4.0测定)
5.抗药性检测:乙酰胆碱酯酶活性抑制率≤30%(参照LC50值)
检测范围
1.十字花科蔬菜:甘蓝/花椰菜叶片样本(采集部位:叶脉基部)
2.核果类果树:樱桃/桃树嫩梢样本(采集时间:花期后15天)
3.油料作物:油菜茎秆样本(取样标准:GB/T28068-2011)
4.观赏植物:月季/蔷薇盆栽植株(运输条件:4℃恒温保存)
5.加工农产品:脱水蔬菜制品(检测限:≥3头/kg)
检测方法
1.ISO21571:2013分子生物学核酸提取规范
2.GB/T34748-2017蚜虫显微形态测量规程
3.ASTME1752-17昆虫抗药性生物测定标准
4.NY/T3086-2017农作物害虫检疫技术规程
5.SN/T4339-2015进出境植物检疫蚜虫种类鉴定
检测设备
1.LeicaDM750生物显微镜(配置DFC450数码相机,放大倍数40-1000)
2.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪(检测灵敏度≤5拷贝/μL)
3.BeckmanCoulterAllegraX-30R离心机(最大转速30,000rpm)
4.OhausExplorer准微量天平(量程0.001mg-220g)
5.EppendorfMastercyclerX50梯度PCR仪(温控精度0.1℃)
6.MilestoneETHOSUP微波消解仪(温度范围50-300℃)
7.Agilent4200TapeStation核酸分析系统(DNA检测范围200-60,000bp)
8.OlympusSZX16体视显微镜(变焦比16.4:1)
9.MemmertIPP400培养箱(温度均匀性0.3℃)
10.SartoriusPB-10pH计(分辨率0.01pH)