检测项目
1.糖基化位点定位:采用LC-MS/MS分析N/O连接位点及修饰比例(精度0.05%)
2.单糖组成分析:定量测定甘露糖/葡萄糖胺等8种单糖含量(检出限0.1μg/mL)
3.糖链结构解析:通过MALDI-TOFMS测定分支度及连接方式(分辨率≥30,000)
4.分子量分布:SEC-MALS联用测定10-150kDa范围聚合度(RSD<2%)
5.纯度测定:RP-HPLC法计算主峰面积占比(柱效≥15,000plates/m)
检测范围
1.生物制药:单克隆抗体(如利妥昔单抗)、重组蛋白药物
2.食品添加剂:功能性糖肽类营养强化剂
3.临床诊断:肿瘤标志物CA19-9等糖蛋白类试剂
4.科研材料:同位素标记糖肽标准品(13C/15N)
5.化妆品原料:胶原蛋白糖基化修饰产物
检测方法
1.ASTME2694-21《基于色谱法的糖蛋白表征规程》
2.ISO21314:2019《质谱法测定糖链分子量》
3.GB/T35833-2018《高效液相色谱法测定食品中低聚糖》
4.GB/T38165-2019《临床质谱用多肽参照物质》
5.ISO21392:2021《核磁共振波谱法解析多糖结构》
检测设备
1.Agilent1260InfinityIIHPLC系统:配备荧光检测器(Ex/Em=280/350nm)
2.ThermoQExactiveHF-X质谱仪:Orbitrap技术(分辨率240,000@m/z200)
3.WatersACQUITYUPLCH-Class系统:BEHGlycan色谱柱(1.7μm,2.1150mm)
4.BrukerAvanceIIIHD600MHz核磁共振仪:配备5mmTCI低温探头
5.ShimadzuRF-20Axs荧光检测器:波长精度1nm
6.MalvernOMNISEC多角度光散射仪:测量范围10^3-10^7Da
7.DionexICS-5000+离子色谱系统:CarboPacPA20分析柱
8.AppliedBiosystems4800MALDI-TOF/TOF:质量精度<3ppm
9.GEKTApure25层析系统:Superdex200Increase色谱柱
10.HitachiL-8900氨基酸分析仪:茚三酮柱后衍生系统