检测项目
1.总谷胱甘肽浓度测定:定量范围0.1-50μmol/L,精度5%
2.还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)比值:正常参考值10:1至30:1
3.谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性:测定波长340nm,单位定义每分钟催化1μmolNADPH氧化
4.γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)活性:反应体系含L-谷氨酸/半胱氨酸/ATP
5.游离巯基含量测定:DTNB显色法,线性范围0.05-2.0mmol/L
检测范围
1.全血样本:需EDTA抗凝管采集并避光保存
2.血浆样本:3000g离心15分钟分离后-80℃冻存
3.血清样本:静置凝固后2000g离心10分钟制备
4.红细胞裂解液:溶血后测定细胞质内GSH含量
5.生物制品质量控制:注射用谷胱甘肽制剂纯度分析
检测方法
1.分光光度法:GB/T34799-2017《还原型谷胱甘肽测定》
2.HPLC法:ISO23893-3:2012《水质-生物标志物测定-第3部分》
3.酶循环法:ASTME2935-13《体外测定抗氧化剂标准指南》
4.LC-MS/MS法:GB/T39560-2020《电子电气产品中限用物质测定》附录B
5.荧光探针法:ISO21427-2:2006《遗传毒性评价技术规范》
检测设备
1.Agilent1260InfinityIIHPLC系统:配备DAD检测器及ZORBAXEclipsePlusC18色谱柱
2.ThermoScientificGENESYS150紫外可见分光光度计:波长范围190-1100nm
3.WatersXevoTQ-S三重四极杆质谱仪:ESI离子源结合MassLynx软件平台
4.BioTekSynergyH1多功能酶标仪:支持荧光/化学发光/紫外可见多模式检测
5.Eppendorf5430R高速冷冻离心机:最大转速30,000rpm带温控系统
6.Metrohm859Titrotherm自动电位滴定仪:用于巯基含量精确测定
7.BeckmanCoulterAU5800全自动生化分析仪:支持GPx酶活性批量检测
8.MettlerToledoSevenExcellencepH计:精度0.001pH单位带温度补偿功能
9.LabconcoFreeZone冻干机:用于生物样本低温浓缩处理
10.SartoriusCubisII微量天平:称量范围0.1μg至52g符合GLP规范