检测项目
1.菌核密度测定:单位面积(cm)内≥2mm菌核数量统计
2.菌丝生长速率:25℃条件下PDA培养基日扩展量(mm/d)
3.致病性验证:离体叶片接种72h病斑直径(mm)
4.β-葡萄糖苷酶活性:分光光度法测定405nm吸光度值
5.ITS序列比对:18S-28SrRNA基因间隔区序列相似度(%)
6.土壤带菌量:选择性培养基CFU/g干土计数
检测范围
1.除虫菊植株根茎部组织样本
2.田间表层土壤(0-15cm深度)
3.温室栽培基质(泥炭:珍珠岩=3:1)
4.感染植株叶片病斑边缘组织
5.商业化除虫菊种子批样品
检测方法
1.ISO21427:2016《植物病原真菌菌核定量分析》
2.GB/T3543.5-2020《农作物种子检验规程分子检测》
3.ASTMD7907-14《土壤中丝核菌属定量培养标准指南》
4.NY/T3088-2017《植物病原真菌致病性测定技术规范》
5.ISO21527-2:2008《真菌毒素检测-菌丝生物量测定》
检测设备
1.OlympusBX53荧光显微镜(400显微测量)
2.ThermoScientificNanoDrop2000c核酸浓度测定仪
3.EppendorfMastercyclerX50梯度PCR仪
4.MemmertIPP110培养箱(温控精度0.1℃)
5.SartoriusQuintix224-1CN分析天平(0.1mg精度)
6.BioTekSynergyH1酶标仪(4区温控功能)
7.LabconcoPurifierLogic+生物安全柜(ClassIIA2型)
8.ThermoHerathermIGS180制冰机(日产量24kg)
9.ECHORevolve正倒置一体显微镜(4K成像系统)
10.OhausPioneerPA214CpH计(自动温度补偿)