检测项目

1.虫体形态特征鉴定:体长3.5-5.2mm,前胸背板黑斑数量≥4个,后足胫节刺列间距≤0.15mm

2.基因序列比对:COI基因片段(658bp)与数据库相似度≥98%

3.抗药性监测:乙酰胆碱酯酶活性抑制率≤30%(100ppm浓度)

4.卵孵化率测定:25℃/RH70%条件下孵化周期7-9天

5.种群密度统计:单位面积(m)成虫数量≥15只判定为重度侵染

检测范围

1.农作物类:水稻穗粒、棉花蕾铃、大豆豆荚等田间样本

2.木材制品:松木/桦木家具半成品含水率≤18%的板材

3.纺织原料:棉麻混纺胚布克重≥200g/m的仓储品

4.仓储物证:小麦/玉米原粮含水量12-14%的库存样本

5.园林植物:月季/牡丹新鲜花苞直径≥15mm的观赏植株

检测方法

1.形态学鉴定:GB/T31748-2015《农业害虫形态鉴定技术规范》体视显微镜观察法

2.分子生物学检测:ISO/IEC17025:2017《DNA条形码技术操作指南》PCR扩增流程

3.抗药性测定:GB/T17980.56-2004《农药田间药效试验准则》点滴法施药程序

4.卵孵化实验:ASTME2813-18《昆虫发育周期测定标准方法》恒温培养箱法

5.种群密度统计:GB/T31747-2015《农林害虫调查规范》五点取样法

检测设备

1.NikonECLIPSECi-L生物显微镜:400倍率下观测虫体刚毛分布特征

2.Bio-RadT100ThermalCyclerPCR仪:完成COI基因片段扩增程序

3.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪:测定乙酰胆碱酯酶活性OD值

4.BinderKBF720恒温恒湿箱:控制温度0.5℃精度培养虫卵样本

5.MettlerToledoME204电子天平:精确称量0.1mg级虫体样本重量

6.LeicaM205C体视显微镜:三维观测口器结构及产卵器形态

7.Eppendorf5430R高速离心机:完成DNA提取液12000rpm离心分离

8.ShimadzuUV-2600i分光光度计:测定DNA样品纯度OD260/OD280比值