检测项目

1.菌落总数测定：采用CFU/g(mL)定量分析（培养温度371℃，时间483h）

2.耐热性测试：80℃水浴处理10min后存活率测定（D值计算）

3.芽孢形成率检测：孔雀绿染色法（显微镜计数≥1000倍视野）

4.生化特性鉴定：VP试验、硝酸盐还原试验（37℃培养24h判读）

5.分子生物学鉴定：16SrRNA基因测序（引物27F/1492R）

6.抗生素敏感性：纸片扩散法（CLSIM45-A3标准）

检测范围

1.食品原料及添加剂：淀粉类制品、调味料（盐渍品≥8%NaCl耐受测试）

2.乳制品：奶粉（水分活度≤0.3样品预处理）、液态奶（巴氏杀菌验证）

3.药品原料：中药材提取物（孢子萌发抑制试验）、注射用水系统监测

4.环境样本：洁净车间沉降菌（φ90mmTS平板采样4h）

5.饲料产品：鱼粉（硫乙醇酸盐培养基验证需氧/厌氧生长）

检测方法

ASTMD932-15《膜过滤法测定水中微生物》孢子富集技术

ISO7932:2004《食品微生物学-蜡样芽孢杆菌计数》平行验证方案

GB4789.3-2016《食品安全国家标准平板计数法》修订条款应用

GB/T13093-2020《饲料中细菌总数测定》耐热菌专项处理程序

USP<61>非无菌产品微生物限度检查厌氧培养补充试验

检测设备

ThermoScientificHerathermIMC18微生物培养箱（温度波动0.5℃）

SartoriusMD8微生物膜过滤系统（孔径0.45μm硝酸纤维素膜）

BinderCB170厌氧工作站（O₂浓度≤0.1%实时监控）

OlympusCX43生物显微镜（配备DP27数码成像系统）

BioMerieuxVITEK2Compact全自动微生物鉴定仪（GP卡鉴定芽孢菌）

MemmertIPP110恒温水浴锅（温度均匀性0.2℃）

SanyoMLS-3781高压灭菌器（验证用生物指示剂测试）

BeckmanCoulterZ2颗粒计数器（孢子悬液浓度校准）

ThermoScientific1300系列生物安全柜（A2型二级防护）

Eppendorf5804R高速冷冻离心机（孢子收集转速≥10,000g）