检测项目
1.致病菌分离鉴定:包含菌丝形态观察(直径0.8-1.5μm)、分生孢子尺寸测量(长度12-18μm宽度3.5-4.5μm)及rDNA-ITS序列比对分析
2.孢子悬浮液浓度测定:采用血球计数板法测定≥110⁶CFU/mL的活性孢子浓度
3.寄主抗性测试:设置0-4级病斑分级标准(直径≤2mm为1级,≥10mm为4级)
4.毒素成分分析:检测赤霉烯酮(ZEN)含量(HPLC法检出限0.05mg/kg)
5.土壤带菌量检测:采用选择性培养基测定菌落数(CFU/g干土)
检测范围
1.豆科作物种子:包括赤豆、绿豆、豇豆等带菌筛查
2.田间病株样本:叶片病斑组织及茎秆维管束取样
3.土壤基质:耕作层(0-30cm深度)病原菌残留量监测
4.农产品加工品:豆类制品中真菌毒素污染检测
5.农用包装材料:麻袋、塑料筐等运输载体的表面孢子附着量测定
检测方法
1.ISO21527:2008《食品和动物饲料中真菌毒素的测定》
2.GB/T36859-2018《植物病原真菌分子检测规范》
3.ASTMD7780-2012《土壤中真菌孢子的标准测试方法》
4.NY/T3088-2017《农作物病害田间调查技术规范》
5.GB23200.112-2018《植物源性食品中9种真菌毒素的测定》
检测设备
1.OlympusBX53荧光显微镜:配备DP80双摄像头系统(400-1000观测孢子形态)
2.Bio-RadT100PCR仪:支持梯度PCR(退火温度55-65℃可调)
3.Agilent1260HPLC系统:配置FLD荧光检测器(激发波长365nm/发射波长435nm)
4.MemmertICP600恒温培养箱:温度控制精度0.3℃(培养温度25-30℃)
5.SartoriusQuintix224-1CN电子天平:称量精度0.1mg(样品称量范围0-220g)
6.ThermoScientificHeratherm烘箱:最高温度300℃(玻璃器皿灭菌程序121℃30min)
7.Eppendorf5920R高速离心机:最大转速20,000rpm(用于DNA提取)
8.MilliporeMilli-Q纯水系统:产水电阻率18.2MΩcm(制备分子级实验用水)
9.LabconcoClassII生物安全柜:HEPA过滤效率99.99%(病原微生物操作防护)
10.LI-COROdyssey成像系统:双色红外荧光扫描(Westernblot结果分析)