检测项目
1.形态学鉴定:体长(0.8-1.2mm)、触角节数(6节)、腹管长度(0.15-0.20mm)、尾片形状(半圆形)及体色(黄绿色至深绿色)
2.分子生物学检测:COI基因序列比对(658bp)、ITS1区段扩增(300-400bp)、18SrRNA特异性引物设计(Tm值582℃)
3.寄主植物关联性分析:刺吸式口器残留物显微检测(400倍率)、韧皮部损伤面积测定(精度0.01mm)
4.种群动态监测:单株虫口密度统计(头/叶)、世代周期测定(温度25℃时14-16天)、产卵量记录(20-30粒/雌)
5.抗药性监测:LC50值测定(有机磷类≤0.05mg/L)、代谢酶活性检测(GSTs≥3.5U/mg蛋白)、靶标突变位点筛查(Ace1基因G119S突变)
检测范围
1.蔷薇科植物样本:苹果、梨、桃等果树叶片及嫩梢组织切片
2.豆科作物样本:大豆、蚕豆茎秆韧皮部渗出液提取物
3.土壤残留物样本:耕作层0-20cm土壤中越冬卵分离物
4.农产品检疫样本:进出口水果表皮附着虫体及卵粒筛查
5.农药制剂样本:拟除虫菊酯类药剂有效成分残留量验证
检测方法
1.ISO21571:2005分子生物学检测核酸提取与纯化流程
2.ASTME1752-08昆虫标本显微成像标准化操作规范
3.GB/T31746-2015蚜虫类害虫形态学鉴定技术规程
4.ISO16577:2016植物病原生物分子标记验证方法
5.GB/T17980.11-2000农药田间药效试验准则(蚜虫类)
检测设备
1.HitachiSU3500扫描电镜:虫体表面微结构三维成像(分辨率3nm)
2.LeicaDM500生物显微镜:体视特征观测(最大放大倍数1000)
3.Bio-RadT100PCR仪:基因扩增程序控制(温控精度0.1℃)
4.Agilent4200TapeStation系统:DNA/RNA完整性评估(灵敏度1ng/μL)
5.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪:代谢酶活性比色测定(波长范围340-850nm)
6.SartoriusCP225D电子天平:虫体称量(精度0.01mg)
7.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机:核酸分离纯化(最大转速30,000rpm)
8.OlympusSZX16体视显微镜:活体虫态行为观察(变倍比16:1)