检测项目
1.形态学鉴定:体长0.9-1.8mm测量误差≤0.02mm;触角6节占比≥98%;腹管长度与尾片比值1.6-2.1
2.线粒体COI基因测序:目标片段658bp扩增效率≥95%,测序覆盖率≥99.9%,SNP检出限0.1%
3.共生菌Buchneraaphidicola检测:16SrRNA基因拷贝数≥10^3/个体
4.抗药性基因突变分析:E4/F型酯酶活性比≥3.0时判定为抗性品系
5.种群遗传多样性:微卫星位点多态性指数PIC≥0.6
检测范围
1.田间采集的活体虫样(含若虫/成虫/卵)
2.进出口植物检疫截获标本(棉花/黄瓜/柑橘等寄主植物)
3.土壤基质中越冬卵密度(0-20cm土层)
4.温室栽培系统空气传播虫体捕获量(黄板诱集率≥85%)
5.农产品包装材料残留虫体(瓦楞纸/塑料膜表面)
检测方法
ISO21571:2005分子生物学检测规范(核酸提取与扩增)
GB/T28068-2011蚜虫类检疫鉴定技术规程
ASTME1752-17昆虫标本显微测量标准指南
NY/T3087-2017农作物害虫抗药性监测技术规范
SN/T4419-2016进出境植物检疫蚜虫种类PCR鉴定方法
检测设备
LeicaM205C体视显微镜:20-160连续变倍,分辨率2μm
ThermoNanoDropOne紫外分光光度计:核酸纯度OD260/280≥1.8判定标准
ABIVeritiPro梯度PCR仪:温度均一性0.3℃
IlluminaMiSeq测序平台:PE300读长模式,Q30≥80%
Agilent4200TapeStation生物分析仪:DNA完整性数≥7.0
OlympusBX53荧光显微镜:激发波长450-490nm
SartoriusCP225D电子天平:称量精度0.01mg
HitachiSU3500扫描电镜:二次电子分辨率3nm@15kV
Bio-RadChemiDocMP成像系统:化学发光灵敏度fg级
EscoAC2-4S1生物安全柜:垂直层流风速0.3m/s20%