检测项目

1.XPA-XPG基因全外显子测序:覆盖ERCC1-8基因组的214个外显子区域,测序深度≥100

2.紫外线敏感性试验:采用UVA(365nm)与UVB(312nm)双波段照射系统,剂量梯度0-20J/m

3.成纤维细胞克隆存活率测定:经10J/mUVB照射后48小时存活率≤30%为阳性阈值

4.环丁烷嘧啶二聚体(CPD)定量分析:LC-MS/MS法检测限达0.1pg/mg蛋白

5.核苷酸切除修复能力评估:放射性标记质粒修复效率≤45%判定异常

检测范围

1.皮肤活检组织:3mm穿刺样本用于原代成纤维细胞培养

2.外周血淋巴细胞:EDTA抗凝全血≥5ml用于基因组DNA提取

3.口腔黏膜细胞:专用拭子采集颊黏膜脱落细胞

4.羊水细胞:妊娠16-20周采集20ml羊水进行产前诊断

5.石蜡包埋组织:存档病理切片用于追溯性基因检测

检测方法

1.ISO15189:2012《医学实验室质量和能力要求》全程质控体系

2.GB/T30988-2014《人类基因突变检测技术规范》指导Sanger验证

3.ASTME3027-15紫外线照射设备校准标准

4.IlluminaTruSightInheritedDiseasePanel进行靶向捕获测序

5.Agilent2100Bioanalyzer进行DNA完整性评估(RIN≥7.0)

检测设备

1.ThermoFisherQuantStudio6Pro实时荧光定量PCR仪:用于Sanger测序验证

2.IlluminaNovaSeq6000测序平台:全外显子测序通量≥80Gb/run

3.UVPCL-1000紫外交联仪:精确控制UVB照射剂量2%

4.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪:检测细胞凋亡率分辨率0.5%

5.WatersXevoTQ-S微升液相色谱质谱联用仪:CPD定量分析精度0.01ppb

6.OlympusIX83倒置荧光显微镜:自动计数克隆形成率误差≤3%

7.EppendorfBioPhotometerD30核酸浓度测定仪:波长精度0.5nm

8.MemmertCO₂培养箱:温度控制精度0.1℃