检测项目
1.病原菌(Sclerotiumrolfsii)形态学鉴定:菌丝直径3-8μm,菌核直径0.5-2mm
2.菌核数量测定:每克样本菌核数≥50个为阳性阈值
3.土壤pH值检测:pH>6.5时病害风险显著升高
4.植株组织侵染率测定:病斑面积占比≥5%判定为感染
5.温湿度耐受性测试:25-35℃/RH>90%条件下菌丝生长速率≥2mm/24h
检测范围
1.毛地黄根茎部腐烂组织样本
2.发病植株叶片白色绢丝状菌丝体
3.育苗期种子表面带菌筛查
4.种植区0-20cm耕作层土壤样本
5.未腐熟有机肥料中病原菌残留检测
检测方法
1.GB/T28084-2011《植物病原真菌分离培养技术规范》
2.ISO10381-6:2009《土壤质量-取样-第6部分:微生物过程评估指南》
3.ASTMD4972-19《土壤pH值标准测试方法》
4.GB/T32723-2016《植物病害症状诊断规程》
5.ISO21527-2:2008《真菌毒素检测-第2部分:产毒真菌计数》
检测设备
1.OlympusBX53荧光显微镜:400显微观测菌丝分支角度及锁状联合特征
2.ThermoScientificHeratherm微生物培养箱:温度控制精度0.5℃
3.SartoriusCP225D电子天平:称量精度0.01mg用于菌核称重
4.Eppendorf5430R高速冷冻离心机:15000rpm分离菌丝碎片
5.Metrohm902Titrando自动电位滴定仪:土壤pH值精确测定至0.01
6.Bio-RadT100ThermalCyclerPCR仪:ITS基因序列扩增鉴定病原种属
7.MemmertHPP750恒温恒湿箱:模拟田间温湿度环境进行致病性验证
8.LeicaCM1950冷冻切片机:制备10μm厚植物组织病理切片
9.ThermoNanoDropOne紫外分光光度计:DNA浓度测定OD260/280≥1.8
10.SartoriusMillipore微生物过滤系统:0.45μm滤膜富集土壤悬浮液中的菌核