检测项目
1.病原菌分离培养:采用PDA培养基进行菌落形态观察(温度251℃,湿度80%)
2.孢子形态学鉴定:测量分生孢子尺寸(长度15-30μm宽度8-18μm)及附属丝特征
3.分子生物学检测:ITS序列扩增(引物ITS1/ITS4),PCR产物测序比对NCBI数据库
4.孢子悬浮液浓度测定:血球计数板法(浓度范围10^3-10^6spores/mL)
5.杀菌剂抗性测试:咪鲜胺EC50值测定(浓度梯度0-100mg/L)
检测范围
1.金钱掌属植物新鲜叶片样本(含典型病斑区域)
2.温室栽培基质及土壤残留物(深度0-20cm)
3.灌溉用水微生物污染分析(过滤膜孔径0.45μm)
4.植株表面附着孢子采集(胶带粘贴法取样面积4cm)
5.周边伴生植物交叉感染筛查(取样半径10m内)
检测方法
1.ISO16067-1:2018《植物病原真菌孢子采集与计数规范》
2.GB/T3543.5-1995《农作物种子检验规程真菌病害检验》
3.ASTMD8083-16《分子生物学方法鉴定植物病原真菌标准指南》
4.SN/T1809-2006《进出境植物白粉病菌检疫鉴定方法》
5.NY/T1156.12-2008《农药室内生物测定试验准则白粉病菌》
检测设备
1.OlympusBX53荧光显微镜(1000油镜观察孢子形态)
2.Bio-RadT100ThermalCyclerPCR仪(ITS基因扩增)
3.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机(12000rpm孢子富集)
4.ThermoScientificNanoDrop2000分光光度计(DNA纯度OD260/280测定)
5.MemmertICP800恒温培养箱(温度精度0.3℃)
6.SartoriusQuintix224-1CN电子天平(称量精度0.1mg)
7.MilliporeMilli-QIQ7000超纯水系统(电阻率18.2MΩcm)
8.EscoAC2-4S1生物安全柜(HEPA过滤效率99.99%)
9.LeicaCM1950冰冻切片机(组织样本制备厚度10μm)
10.ShimadzuGCMS-QP2020NX气质联用仪(杀菌剂残留分析)