检测项目

1.直接免疫荧光（DIF）检测：IgG/IgA/C3在表皮细胞间沉积强度（荧光强度分级0-4+），阳性率＞90%

2.Tzanck涂片检查：棘层松解细胞检出率（≥3个多核巨细胞/高倍视野为阳性）

3.酶联免疫吸附试验（ELISA）：抗桥粒芯蛋白1/3抗体（Dsg1/Dsg3）浓度阈值＞20U/mL

4.组织病理学检查：表皮内水疱形成深度（基底层上裂隙），棘层松解指数≥30%

5.间接免疫荧光（IIF）检测：猴食管上皮抗体滴度（≥1:40为临床意义阳性）

检测范围

1.新鲜皮肤活检组织（直径≥4mm）

2.血清样本（采集后2小时内分离）

3.口腔黏膜刮片（含基底细胞的完整上皮层）

4.新鲜疱液样本（无菌采集未破溃水疱）

5.石蜡包埋组织切片（厚度4-5μm）

检测方法

1.免疫荧光法依据CLSIMM17-A标准及WS/T416-2013《自身抗体检测导则》

2.Tzanck涂片执行WHO皮肤病理诊断技术规范（2018版）

3.ELISA检测参照GB/T37868-2019《体外诊断试剂性能评估方法》

4.组织病理学处理符合ISO15189:2012医学实验室质量要求

5.间接免疫荧光采用欧蒙诊断系统标准化操作流程（版本5.0）

检测设备

1.奥林巴斯BX53荧光显微镜：配备U-FBNA窄带滤光片组，激发波长488nm/594nm

2.BDFACSCantoII流式细胞仪：配置405/488/640nm三激光系统

3.ThermoMultiskanFC酶标仪：波长范围340-850nm，分辨率1nm

4.LeicaRM2235切片机：切割精度1μm，最大标本尺寸5060mm

5.DakoAutostainerLink48全自动染色机：支持双探针同步染色作业

6.Bio-RadChemiDocMP成像系统：CCD分辨率13601024像素

7.SiemensImmulite2000XPi化学发光仪：检测灵敏度0.01IU/mL

8.EppendorfCentrifuge5430R冷冻离心机：最大转速30,000rpm

9.RocheLightCycler480II实时PCR仪：