检测项目
1.成虫形态特征鉴定:体长0.8-1.2mm,触角8节,足胫节端部具透明孔
2.若虫蜡质分泌物分析:C30-C34长链烃类化合物含量≥85%
3.DNA条形码检测:COI基因序列比对(GenBank登录号KY464201-KY464215)
4.虫卵密度测定:每平方厘米叶片卵量≥50粒为重度感染
5.共生菌Wolbachia检测:wsp基因PCR扩增(引物序列81F/691R)
检测范围
1.柑橘属植物新鲜果实及加工制品(果径≥5cm)
2.芸香科观赏植物(九里香、金桔等)栽培基质
3.进出口木质包装材料(ISPM15标准适用)
4.温室栽培设施内壁残留物(离地高度≤2m)
5.植物检疫证书申报的嫁接用接穗材料
检测方法
ISO23526:2020《植物检疫-粉蚧科分子鉴定技术规范》DNA提取浓度≥20ng/μL
GB/T28068-2011《柑橘危险性害虫检疫鉴定方法》体视显微镜放大倍率40-100
SN/T1379-2016《进出境种苗粉蚧检疫规程》样本预处理温度552℃/30min
ASTME1752-17《植物病虫害分子检测通用指南》PCR循环参数:预变性94℃/5min
GB/T36850-2018《农药残留检测样本制备规范》离心机转速3000r/min5%
检测设备
NikonSMZ25体视显微镜:20目镜+0.75物镜,LED环形冷光源系统
ThermoNanoDropOneC核酸浓度测定仪:检测波长260/280nm,精度1.0ng/μL
Bio-RadT100PCR仪:96孔模块温控精度0.2℃,支持梯度PCR功能
LeicaCM1950冷冻切片机:标本台温度-35℃至+50℃,切片厚度1-60μm可调
Agilent4200TapeStation生物分析仪:DNA完整性指数(DIN)≥7.0判定合格
SartoriusCP225D电子天平:称量范围0.01mg-220g,符合GLP规范
Eppendorf5430R高速离心机:最大转速15000rpm,转子适配161.5mL试管
MemmertIPP110培养箱:温度范围0-70℃,湿度控制精度3%RH
HamiltonMICROLABSTARlet自动移液平台:液体处理精度CV≤1%(10μL量程)
OlympusBX53荧光显微镜:配备U-FBNA窄带滤光片组(激发波长470-495nm)