检测项目

1.成虫形态特征鉴定:体长0.8-1.2mm,触角8节,足胫节端部具透明孔

2.若虫蜡质分泌物分析:C30-C34长链烃类化合物含量≥85%

3.DNA条形码检测:COI基因序列比对(GenBank登录号KY464201-KY464215)

4.虫卵密度测定:每平方厘米叶片卵量≥50粒为重度感染

5.共生菌Wolbachia检测:wsp基因PCR扩增(引物序列81F/691R)

检测范围

1.柑橘属植物新鲜果实及加工制品(果径≥5cm)

2.芸香科观赏植物(九里香、金桔等)栽培基质

3.进出口木质包装材料(ISPM15标准适用)

4.温室栽培设施内壁残留物(离地高度≤2m)

5.植物检疫证书申报的嫁接用接穗材料

检测方法

ISO23526:2020《植物检疫-粉蚧科分子鉴定技术规范》DNA提取浓度≥20ng/μL

GB/T28068-2011《柑橘危险性害虫检疫鉴定方法》体视显微镜放大倍率40-100

SN/T1379-2016《进出境种苗粉蚧检疫规程》样本预处理温度552℃/30min

ASTME1752-17《植物病虫害分子检测通用指南》PCR循环参数:预变性94℃/5min

GB/T36850-2018《农药残留检测样本制备规范》离心机转速3000r/min5%

检测设备

NikonSMZ25体视显微镜:20目镜+0.75物镜,LED环形冷光源系统

ThermoNanoDropOneC核酸浓度测定仪:检测波长260/280nm,精度1.0ng/μL

Bio-RadT100PCR仪:96孔模块温控精度0.2℃,支持梯度PCR功能

LeicaCM1950冷冻切片机:标本台温度-35℃至+50℃,切片厚度1-60μm可调

Agilent4200TapeStation生物分析仪:DNA完整性指数(DIN)≥7.0判定合格

SartoriusCP225D电子天平:称量范围0.01mg-220g,符合GLP规范

Eppendorf5430R高速离心机:最大转速15000rpm,转子适配161.5mL试管

MemmertIPP110培养箱:温度范围0-70℃,湿度控制精度3%RH

HamiltonMICROLABSTARlet自动移液平台:液体处理精度CV≤1%(10μL量程)

OlympusBX53荧光显微镜:配备U-FBNA窄带滤光片组(激发波长470-495nm)