检测项目

1.IgM抗体检测：采用酶联免疫吸附法（ELISA），灵敏度≥95%，特异性≥98%，临界值OD450nm≥0.3

2.IgG抗体中和试验：测定中和抗体效价≥1:8为阳性反应

3.病毒RNA定量分析：实时荧光定量PCR法（RT-qPCR），最低检出限100copies/mL

4.病毒分离培养：Vero细胞系培养法，观察CPE效应时间≤7天

5.抗原快速检测：胶体金免疫层析法（GICA），15分钟判读结果

6.基因分型测序：Sanger测序法覆盖SH基因全序列（316bp）

检测范围

1.急性期患者血清样本（发病后3-7天采集）

2.唾液标本（无菌拭子采集量≥1mL）

3.脑脊液标本（并发脑膜炎病例）

4.疫苗株鉴定样本（JerylLynn株或S79株）

5.环境物表拭子（暴发疫情溯源）

6.咽拭子标本（发病早期采集）

检测方法

1.GB/T14926.50-2020《实验动物微生物学检验方法》ELISA法

2.WS295-2019《流行性腮腺炎诊断标准》病毒分离规范

3.ISO15189:2022《医学实验室质量和能力要求》质控体系

4.YY/T1235-2022《流行性腮腺炎病毒IgM抗体检测试剂盒》技术要求

5.ASTME2888-19《分子诊断标准化操作指南》qPCR流程

6.GB/T40982-2021《新型冠状病毒核酸检测通则》生物安全要求

检测设备

1.ThermoFisherQuantStudio7500Real-TimePCR系统：支持TaqMan探针法多重核酸检测

2.EppendorfCentrifuge5430R：最大转速30,000rpm，适配病毒浓缩离心管

3.BioTekELx808酶标仪：波长范围400-750nm，支持双波长自动校正

4.EscoAirstreamA2生物安全柜：二级防护等级，HEPA过滤效率99.999%

5.OlympusBX53荧光显微镜：配备470nm激发光源和FITC滤光片组

6.MemmertCO₂培养箱：温度控制精度0.1℃，CO₂浓度波动≤0.2%

7.BeckmanCoulterAccess2免疫分析仪：每小时200测试通量

8.SartoriusQuintix224-1CN电子天平：称量精度0.1mg

9.HamiltonMicrolabSTARlet液体工作站：移液精度CV≤1%

10.PanasonicMDF-ULT2386超低温冰箱：-86℃长期保存病毒毒株